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HE染色 方法步骤
“HE 染色过程”
试验前准备: 4%多聚甲醛固定,石蜡包埋切片
试剂名称:无水乙醇,氨水,冰乙酸,盐酸,二甲苯,中性树胶,HE 染液
配制试剂:
1%盐酸乙醇分化液配制:
36%—38%盐酸:1ml
75%乙醇:99ml
0.2%氨水配制:
25%—28%氨水:0.2ml
自来水:100ml
pH 值在7.5—8之间
试验过程:记录试验的具体步骤,
烤片:2小时,温度60℃(目的:使组织切片与载玻片贴合的更加紧密)
2.切片脱蜡至水:
①二甲苯Ⅰ:10min
②二甲苯Ⅱ:10min
③无水乙醇Ⅰ:5min
④无水乙醇Ⅱ:5min
⑤95%乙醇:2min
⑥90%乙醇:2min
⑦80%乙醇:2min
⑧70%乙醇:2min
⑨自来水洗:2min
3.染色:
①苏木精染色:10min
②自来水洗:1min
③1%盐酸乙醇分化:数秒
④自来水洗:1min
⑤0.2%氨水返蓝:30s±
⑥自来水洗:1min
⑦伊红染色:5min
⑧自来水洗:速洗
4. 37℃烘干0.5h以上,中性树胶封固
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