2薄层注意事项.ppt

薄层色谱中应注意的问题 理想的色谱分离及准确的定量结果的前提是： -----色谱条件标准化 -----操作技术规范化。 主要存在问题 ： 薄层板 点样 展开、展开室 展开剂 显色 一、薄层板 注意：无论使用手工铺板还是商品板，薄层 板都应均匀、并到达试验要求的分离 度。 二、点样 点样前检查完薄层板后，决定用点状点样（鉴别、检查）还是条带状点样（含量测定）。点样后必须将溶剂全部除去后再进行展开，但要避免高温加热，以免改变待测成分的性质。点样量过多会造成原点“超载”，展开剂产生“绕行”现象使斑点拖尾或重叠，使扫描峰形不对称或不能基线分离，并由于超载导致非线型的校正曲线，严重影响定量结果，降低准确度。 注意：鉴别样溶解后，放入安瓿瓶中而不要放在蒸发皿中。 点样时必须注意勿损伤薄层表面 。 点样斑点干燥后再展开。 样品的粘度要低，否则易扩散。 鉴别分不清斑点，可在样中加标再点一点。 工作时的点样位置 三、展开、展开室 要注意展开室的 ---相对湿度不同，分离效果不同。 ---展开室预饱和，防止边缘效应。另一种方法是板子 未点样端放入展开剂中后迅速拿出再放入。 ---温度：有时温度降低，改善分离效果。 ---展距：过长，斑点扩散；过短，分离效果不好。 ---展开缸应相对应。10*20的板就用10*20的展开缸， ---展开缸盖不宜凡士林，应为毛玻璃盖密封加重物。 控制相对湿度硫酸配制表 四、展开剂 注意每次展开时临用现配展开剂 小比例展开剂用移液管准确加入 展开剂中有氨水时，如展开效果不好，应考虑氨水易挥发，用未开封的氨水重新配制展开剂。 五、显色 喷雾显色：注意雾滴均匀。 浸渍显色 使用CAMAG的浸板器，需要设定浸板器抽出的速度和规定在显色剂中停留的时间。采用这种方法显色，由于浸渍条件可以精确地标准化，并且薄层各部位可以均匀地接触显色剂，，因此对改善定量时的重现性极为有利，此外对环境保护也优于喷雾法，故常采用。浸完的板，要立刻小心擦干背面玻璃上残留的溶液后平放于通风橱中晾干后再加热。 苍术 供试品溶液的制备 取本品粉末0.5g，加正己烷2ml，超声处理15分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。 对照药材溶液的制备 取苍术对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。 薄层板： 硅胶G自制板；固定相硅胶G 60（青岛海洋化工厂），黏合剂0.35%CMC-Na，厚度500μm 10*20cm 色谱图-1 烟台化学工业研究所TLC-G 10*20cm 色谱图-2 MERCK-TLC-G 10*20cm 色谱图-3 MERCK-HPTLC-G 10*10cm 色谱图-4 MN-HPTLC-G 10*20cm 色谱图-5 烟台化学工业研究所HPTLC-G 10*20cm 色谱图-6 MN-TLC-G 20*20cm 色谱图-7 点样 供试液点样2μl与对照液点样4μl 展开剂 石油醚（60～90）℃—乙酸乙酯(20：1) 展开方式 展开缸用展开剂预平衡15分钟，上行展开，展距：8cm。 显色 喷以5％对二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰。 检视 日光下。 手铺板 色谱图-1 国产烟台化学工业研究所TLC --G 色谱图-2 MERCK TLC---G 色谱图-3 MERACK HPTLC---G色谱图4 MN-HPTLC 色谱图-5 MN-TLC 色谱图-7 在分析工作中，洗净玻璃仪器是一个必须做的实验前的准备工作，也是一个技术性的工作。 玻璃仪器特别是容量器皿在使用前必须充分洗涤，化学实验所用的玻璃仪器必须是十分洁净的，否则会影响实验效果，甚至导致实验失败。 洗涤时应根据污物性质和实验要求选择不同方法。 常用的烧杯、三角瓶、量筒等一般玻璃仪器洗涤时，先用自来水冲去灰尘，再用毛刷蘸取洗衣粉等洗涤剂直接刷洗内外表面。刷洗时，使毛刷在盛有水的玻璃仪器里转动或上下移动，但用力不得过猛，否则容易把玻璃仪器（尤其是试管）底部损坏。最后用自来水冲洗干净，用纯化水淋洗三次。玻璃仪器洗净的标准是：内壁上附着的水膜均匀，既不聚成水滴，也不成股流下。 滴定管、容量瓶和移液管等量器不用毛刷刷洗，根据油污程度选择适当的洗涤剂洗。 附：几种常用洗涤液的配制和使用 铬酸洗涤液 （1）取工业硫酸100ml置于烧杯内，小心加热，然后慢慢加入5g