苏教版高中生物选修1生物技术实践血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳.pptVIP

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳 实验目的 1、掌握电泳法分离蛋白质的原理。 2、学习醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质的 原理和操作方法。 3、学习蛋白质染色的方法。 分离蛋白质的方法 分离方法 沉淀法 盐析法 有机溶剂沉淀法 层析法 电学法 电泳法 等电聚焦 超速离心法 离子交换层析 吸附层析 凝胶过滤（分子筛） 亲和层析 实验原理 电泳：是指带电粒子在电场中向本身所带电荷相反的电极移动的现象。 在一定pH条件下，不同的蛋白质由于具有不同的等电点而带不同性质的电荷，因而在一定的电场中它们的移动方向和移动速度也不同，即它们的电泳迁移率不同，因此，可对它们进行分离。 以蛋白质为例： H＋ OH－ H＋ OH－ pHpI pH=pI pHpI 影响电泳迁移率的因素： 1.内在因素：蛋白所带净电荷的性质和电荷的量、蛋白的大小和形状 2.外界因素：电场强度、溶液的pH值、溶液的离 子强度和电渗现象 常见的电泳有： 1.醋酸纤维膜电泳、 2.聚丙烯酰胺凝胶电泳、 3.毛细管电泳 负极 正极 － － － － － － － － 表面带负电荷 带正电荷的水层携带粒子向负极移动 如果样品原本是移向负极的，则泳动的速度加快； 如果样品原本是移向正极的，则泳动