人教版高中生物选修三1.2基因工程的基本操作程序课件.pptVIP

【巩固2】 请据图回答下列问题。 (1)基因工程的核心步骤是_________________________。 (2)利用________技术可以获得大量的目的基因。该技术利用________的原理，将基因的核苷酸序列不断加以复制，使其数量呈指数增长。 (3)图中________位于目的基因的首端， 是________识别和结合的部位。抗生 素抗性基因的作用是作为________， 用 于鉴别受体细胞中是否导入了目的 基因。 解析　本题考查基因表达载体的组成及其构建。基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建；目的基因的获取方法很多，其中PCR技术能迅速获得大量目的基因，其依据的原理是DNA双链复制原理；基因表达载体必须包含目的基因、启动子、标记基因、终止子，其中启动子位于目的基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录为mRNA，抗生素抗性基因作为标记基因用于鉴别受体细胞中是否含有目的基因。 答案　(1)基因表达载体的构建　(2)PCR　DNA双链复制　(3)启动子　RNA聚合酶　标记基因 1．分子检测 (1)检测转基因生物的染色体上是否插入了目的基因，这是目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键。 ①方法： 技术(DNA探针＋转基因生物 )。 ②结果：如果显示出杂交带，就表明目的基因 。 (2)检测目的基因是否转录 ①方法： 技术(DNA探针＋转基因生物 )。 ②结果：如果显示出杂交带，则表明目的基因 。 目的基因的检测与鉴定 DNA分子杂交 DNA 已插入染色体DNA中 分子杂交 mRNA 转录出了mRNA (3)检测目的基因是否翻译成蛋白质 ①方法： 。 ②结果：若有杂交带出现，则表明目的基因 。 2．个体水平鉴定 包括抗虫、抗病的 实验，以确定是否有抗性及抗性程度。基因工程产品需要与天然产品活性进行比较等。 抗原—抗体杂交 已形成蛋白质产品 接种 [思维激活3] 进行目的基因导入及转录检测时，均用到DNA探针，该探针的脱氧核苷酸序列如何？其检测依据是什么？ 提示　把“目的基因片段”进行放射性同位素标记或进行荧光标记，用标记好的基因片段做探针，与受体生物的基因组DNA进行杂交，如果有杂交带出现，根据分子杂交的基本原理，说明目的基因与受体细胞基因组DNA具有同源性，也就是说目的基因已经被导入受体细胞内，反之，则说明目的基因没有进入受体细胞中。 目的基因导入受体细胞的结果分析 说明：上图中发生②与发生①相比，②会使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达，原因是在进行细胞分裂时，细胞核上的DNA经复制后平均分配到两个子细胞中，保证了亲子代遗传性状的稳定性，而①细胞分裂时，细胞质是不均分的，子细胞不一定含有目的基因。 【巩固3】 目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是 (　　)。 ①检测受体细胞是否有目的基因　②检测受体细胞是否有致病基因　③检测目的基因是否转录mRNA　④检测目的基因是否翻译蛋白质 A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．①②④ 解析　目的基因的检测包括：首先检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是用DNA探针，使DNA探针与基因组DNA杂交；其次检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是用基因探针与mRNA杂交；最后检测目的基因是否翻译了蛋白质，方法是进行抗原—抗体杂交。 答案　C 【例1】 水稻种子中70%的磷以植酸形式存在。植酸易同铁、钙等金属离子或蛋白质结合排出体外，是多种动物的抗营养因子，同时，排出的大量磷进入水体易引起水华。为从根本上解决水稻中的高植酸问题，可将植酸酶基因导入水稻，培育低植酸转基因水稻品种。下图是获取植酸酶基因的流程。 目的基因的获取 据图回答下面的问题。 (1)图中基因组文库______(填“小于”“等于”“大于”)cDNA文库。 (2)B过程需要的酶是___________________________________； A、C过程中________(填“可以”“不可以”)使用同一种探针筛选含目的基因的菌株。 (3)目的基因Ⅰ和Ⅱ除从构建的文库中分离外，还可以分别利用图中________和________为模板直接进行PCR扩增，该过程中所用酶的显著特点是_________________________