透明质酸紫杉醇聚电解质复合纳米粒的口服给药研究.ppt

图 3-8 为通过荧光光谱法对一系列浓度的 HA-PTX 键合物水分散液进行芘 激发光谱扫描后，以 I338/I333 对不同 HA-PTX 键合物浓度的对数 logC 做的两条 直线，如图所示，当键合物浓度较低时，呈现一条接近于水平的直线，当键合物 浓度增大到一定程度时， I338/I333突然增大，这表明芘从亲水环境中被包进了疏水 区域，此时胶束开始形成。两条曲线的交点即是 HA-PTX 键合物的临界胶束浓 度，大约是 1×10-3 mg/mL。 小结一 在 DCC 和 DMAP 的催化作用下，通过酯化反应制备了 HA-PTX 键合物，FT-IR 及 1H-NMR 结果表明，目标产物被成功合成且可自组装成核-壳 型结构。HPLC 结果表明 HA-PTX 中紫杉醇的含量为 10.6 wt %。粒径及电位结 果表明 HA-PTX 能在水中形成纳米粒且 pKa 值为 2.1，TEM 说明 HA-PTX 在水 中能自组装成粒径约为 80 nm 左右的纳米粒，临界胶束浓度为 1×10-3 mg/mL HA-PTX CNPs 除了正负 电荷比（CS中的正电NH3+与HA-PTX中的负电-COO-）为1:1时，无法形成聚电解 质复合纳米粒，在其他电荷比如3:2、2:1、3:1和4:1时均能形成粒径约为160-350 nm的CS/HA-PTX CNPs。当正电荷的CS的量远远超过了带负电荷的HA-PTX 时，过量的CS分子覆盖在CS/HA-PTX CNPs表面，形成高溶解性的聚电解质复 合纳米粒。综合各电荷比下的粒径及载药量，电荷比为2:1时聚电解质复合纳米 粒具有较小粒径与较高载药量，进而取其为最佳合成条件 CS/HA-PTX CNPs 图 4-2 A 中，在 2106 cm-1 和 1412 cm-1 处出现了吸收峰， 该峰的出现可能是由于为壳聚糖上的-NH3+与 HA-PTX 纳米粒冻干粉上的-COO发生了静电复合作用。 4 CS/HA-PTX CNPs 其中当pH 值为5.0时，聚电解质复合纳米粒的粒径最小，这就说明此由聚阳离子与聚阴离 子合成的聚电解质复合纳米粒在pH 5.0时稳定性最好。当pH值为1.2或7.4时，聚 电解质复合纳米粒崩解，这是由于在pH 1.2下聚阴离子HA-PTX产生了去质子化 作用而聚阳离子壳聚糖在pH 7.4时发生去质子化作用。 CS/HA-PTX CNPs 壳聚糖和HA-PTX 的pKa值分别为6.5和2.1。在pH 1.2（即饭后胃部pH）下，HA-PTX中的大部分羧 基去质子化形成-COOH，CS与HA-PTX的静电作用较弱，在此pH下形成的聚电 解质复合纳米粒很不稳定，容易解体，如图4-3 A所示。而pH 3.0时，CS/HA-PTX 形成粒径在200 nm左右的聚电解质复合纳米粒，因此，CS/HA-PTX CNPs只能在 饭前服用（饭前胃部pH 2.5-3.7）  CS/HA-PTX CNPs  对比不同 pH 条 件下的三条曲线可知，HA-PTX NPs 具有 pH 敏感性。在酸性环境下 pH=3.0， pH=5.0，纳米粒的药物释放速率要明显高于在 pH=7.4 的释放速率。这种现象主 要是由于在低 pH 值下，有利于聚合物材料的降解。HA 与紫杉醇通过酯键连接， 酸性条件可以促进酯键的水解，从而有利于药物的释放。因此，紫杉醇从 HA-PTX NPs 中的释放在酸性条件下释放速率要比中性条件快。 CS/HA-PTX CNPs HA-PTX NPs 在 pH 3.0（禁食胃液环境）下两小时紫杉醇的累计释放 率大概为 19 %，CS/HA-PTX CNPs 的释放在 pH 3.0 下两小时紫杉醇的累计释放 率大概为 8 %，由此可以看出，聚电解质纳米粒外壳富余的壳聚糖可以保护 PTX 在酸性条件不从 HA-PTX NPs 中释放出来。 CS/HA-PTX CNPs 图 4-7 主要是模拟饭前口服给药的吸收，饭前服用药物制剂其在胃里的存留 时间大概在两小时左右，由图 4-7 可知，在禁食胃液环境中，CS/HA-PTX CNPs 中紫杉醇的累计释放率大概在 11 %左右，能够很好的保持紫杉醇的稳定性进而 到达小肠部位。而当其进入小肠部位时，肠液的 pH 值在 6.0-7.0 间，在此时间段 内 CS/HA-PTX CNPs 中紫杉醇的累计释放率达到 35 %左右 根据此线性 关系，测定已知浓度 RB-HA-PTX NPs 溶液的吸光度，可以计算出其中罗丹明 B 的浓度，计算出 RB-HA-PTX NPs 中罗丹明 B 的含量为 5.1 % 罗丹明 在细胞核和细胞质内均有 分布，并且荧光强度很强，然而进入正常细胞的纳米粒相对来说非常少。这主要 是由于癌细胞表现活跃，RB-HA-PTX NPs