（全国通用版）2019高考生物二轮复习 专题九 现代生物科技专题 考点1 基因工程.pptVIP

;1.基因工程的3种基本工具 (1)限制性核酸内切酶：识别特定核苷酸序列，并在特定位点上切割DNA分子。 (2)DNA连接酶：①E·coli DNA连接酶只能连接黏性末端；②T4 DNA连接酶能连接黏性末端和平末端。 (3)载体：①能在宿主细胞内稳定存在并大量复制；②有一个至多个限制酶切割位点；③具有特殊的标记基因，以便对含目的基因的受体细胞进行筛选。;提醒　(1)限制酶≠DNA酶≠解旋酶 限制酶是切割某种特定的脱氧核苷酸序列，并使两条链在特定的位置断开；DNA酶是将DNA水解为基本组成单位；解旋酶是将DNA的两条链间的氢键打开形成两条单链。 (2)使用限制酶的注意点：a.一般用同种限制酶切割载体和目的基因；b.不同的限制酶也能切割出相同的黏性末端。 (3)DNA连接酶≠DNA聚合酶 DNA连接酶连接两个DNA片段，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上。;2.基因工程的操作流程 (1)目的基因的获取：①从基因文库中获取。②利用PCR技术扩增。③化学方法人工合成。 提醒 　①PCR技术扩增 a.原理：DNA双链复制。 b.条件：模板DNA、引物、游离的脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶。;②化学方法人工合成：已知核苷酸序列的较小基因，直接利用DNA合成仪用化学方法合成，不需要模板。 (2)基因表达载体的构建——重组质粒的构建 ①基因表达载体的组成;②构建过程;提醒　①基