第四章--愈伤组织培养.pptVIP

1、外植体的选择 一般情况下： 双子叶植物 比 单子叶和裸子植物容易 幼年细胞和组织比成年的容易 二倍体细胞比单倍体细胞容易 同一种植物不同基因型诱导愈伤组织的能力也不相同（24个水稻抗稻瘟病单基因鉴别品系悬浮细胞系的建立，14.3%~97.1%,周晓罡等，西南农业学报，2008年03期 ） 2、培养条件 生长素：2,4-D、NAA、IAA等 细胞分裂素 ：6-BA 、KT、ZT等 （一）诱导期（起动期） 1、特点 ①细胞的气体交换迅速增加。 ② 多聚核糖体不断增加：截止M期前，每个细胞中的 RNA含量增加到300％； ③蛋白质发生周期性的积累：每个分裂细胞的总增加量约为200％； ④?酶活力也发生一定的变化：DNA聚合酶活力增加、与代谢有关的酶类，如己糖激酶和一些脱氢酶的活力也增加。 ⑤细胞的大小基本没有变化。 （二）分裂期（Cell division） 1、分裂期细胞的特征 ①外层细胞进行分裂，而中间的细胞不分裂。细胞的数目迅速增加。胡萝卜组织培养7d后，细胞数可增加10倍。 ②?每个细胞平均鲜重下降。 ③?细胞体积小，内无液泡。 ④核和核仁增大到最大。 ⑤RNA含量减少，而DNA含量保持不变。 ⑥随着细胞不断分裂和组织生长，组织的总干重、蛋白质和核酸含量大大增加，新细胞壁的合成极快。 细胞分裂快，结构疏散，缺少有组织的结构，颜色浅而透明。 （三）分化期（ Di