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氨基酸的分离鉴定―滤纸层析法 ;
通过氨基酸的分离:
1.学习纸层析法的基本原理;
2.掌握滤纸层析的操作方法。;
一.滤纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法。以水(被滤纸纤维结合)作为固定相,以有机溶剂为流动相,样品点在滤纸上进行展层,氨基酸在两相中不断分配,因为分配系数不同,故样品随流动相移动的速率不同,从而被分开,形成距原点距离不等的层析点。;原理;显色原理;器 材;1、物质的量为0.008摩尔/升的赖氨酸、亮氨酸、天门冬氨酸、丙氨酸溶液及它们的混合液(各组份物质的量均为0.008摩尔/升)。
2、扩展剂
正丁醇:甲酸:水=70:17:8(体积比)
3、显色剂 2.5%茚三酮丙酮溶液。;
1、准备滤纸 取层析滤纸(15*17cm,距下端2 cm处用铅笔划一条与底边平行的直线,在此直线上每间隔相等距离作一记号,一共做五个记号(点样用)。
2、点样 用毛细管将各氨基酸样品分别点在中间5个记号上,自然风干(或冷风)后再点一次样,每点在纸上扩散的直径???最大不超过5 mm。
;操作;1、整个实验为什么要戴手套进行,且滤纸要妥善保存?
2、为避免实验结果出现“拖尾”现象,实验操作中应注意哪些环节?
3、为什么几种氨基酸在滤纸上会出现上下分布?结合实验原理说说选择其他氨基酸可能会有什么现象。;祝实验成功!
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