分光光度计与吸收光谱分光光度计.ppt

光源 单色器 样品室 检测器 显示 光源 在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。 可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500 nm。 紫外区：氢、氘灯。发射185～400 nm的连续光谱。 基本组成 将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任波长单色光的光学系统。 ①入射狭缝：光源的光由此进入单色器； ②准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束； ③色散元件：将复合光分解成单色光；棱镜或光栅； ④聚焦装置：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦至出射狭缝； ⑤出射狭缝。 2.单色器 3. 样品室 样品室放置各种类型的吸收池（比色皿）和相应的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。在紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池。 4. 检测器 利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，常用的有光电池、光电管或光电倍增管。 5. 结果显示记录系统 检流计、数字显示、微机进行仪器自动控制和结果处理 分光光度计的类型 1.单光束 简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。 2.双光束 自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂，价格较高。 3.双波长 将不同波长的两束单色光(λ1、λ2) 快速交替通过同一吸收池而后到达检测器。产生交流信号。无需参比池。△?=1～2nm。两波长同时扫描即可获得导数光谱。 分光光度计的类型 1.单光束 简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。 2.双光束 自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂，价格较高。 3.双波长 将不同波长的两束单色光(λ1、λ2) 快速交替通过同一吸收池而后到达检测器。产生交流信号。无需参比池。△?=1～2nm。两波长同时扫描即可获得导数光谱。 紫外-可见分光光度计 吸收光谱曲线：物质在不同波长下吸收光的强度大小A～l关系 最大吸收波长 lmax：光吸收最大处的波长 2 吸收光谱 lmax 对比度(Δl):络合物最大吸收波长(lMRmax)与试剂最大吸收波(lRmax)之差 Δl 吸收光谱曲线(curve of absorption spectrum ）： 通过测量某种物质对不同波长单色光的吸光度， 然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标 所绘出的曲线。 用途： 可清楚描述物质对光的吸收情况。 可查找出最大吸收波长(lmax )，用于分光光度测定。 特点：光吸收曲线的形状和lmax 不随有色化合物溶液浓度的改变而改变。 300 400 500 600 700 ?/nm 350 525 545 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 Absorbance Cr2O72-、MnO4-的吸收光谱 350 Cr2O72- MnO4- 吸收曲线的讨论： （1）同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长?max。 （2）不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似λmax不变。而对于不同物质，它们的吸收曲线形状和λmax则不同。 （3）吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质定性分析的依据之一。 （4）不同浓度的同一种物质，在某一定波长下吸光度 A 有差异，在λmax处吸光度A 的差异最大。此特性可作为物质定量分析的依据。 （5）在λmax处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。 本节要点： 单色光、复合光、互补色光 光的加合性与多组分测定 朗伯-比尔定律的内涵 摩尔吸光系数与吸光系数 分光光度计的类型 分光光度计的结构组成及其功能 吸收光谱曲线的绘制及其表达的信息 * * * * * * * * * * * * * * 第九章 吸光光度法 9.1 吸光光度法基本原理 9.2 分光光度计及吸收光谱 9.3 显色反应及影响因素 9.4 光度分析法的设计 9.5 吸光光度法的误差 9.6 吸光光度法的应用 化学分析与仪器分析方法比较 化学分析：常量组分(1%), Er 0.1%～0.2% 依据化学反应, 使用玻璃仪器 准确度高 仪器分析：微量组分(1%), Er 1%～5% 依据物理或物理化学性质, 需要特殊的仪器 灵敏度高 仪器分析方法分类 2. 电化学分析法: 依据物质的电化学性质及其变化 3.色谱法: 气相色谱, 液相色谱 4.质谱法、热分