SN-0331-1994 出口畜产品中炭疽杆菌检验方法.pdf

食品标准网（/ ） SN 0331-94 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口畜产品中炭疽杆菌检验方法 Methods for the inspection of bacillus anthrax in animal by-products for export 代替 ZB X09 010—86 1 主题内容与适用范围 本标准规定了出口畜产品中炭疽杆菌的检验。 本标准适用于出口鬃、毛、绒、野生动物毛皮、生骨粒及其他畜产品中炭疽杆菌的检验。 2 设备和材料 2.1 离心机：带容量在 500mL 以上的离心管。 2.2 恒温培养箱：36±1℃。 2.3 恒温水浴：30～65℃。 2.4 生物学显微镜。 2.5 三角烧瓶：容量 250mL 、500mL 和 1 000mL,带胶塞。 2.6 平皿：直径 90mm 或 100mm 。 2.7 试管：10mm×120mm 和 20mm×140mm 。 2.8 吸管：1 ml 和 10 ml,带 0.01 mL 和 0.1 mL 刻度。 2.9 L 形玻璃棒。 2.10 注射器：1 mL 带 5 号针头。 2.11 棉拭子：长 180 mm 的竹签或铁丝,一端裹 20～30 mm 长的棉球,用水浸湿,另一端裹在 试管的棉塞内,插入试管高压灭菌。 2.12 棉布袋：70 mm×130 mm,带缩口绳。 2.13 养鼠罐。 3 培养基和试剂 3.1 溶菌酶多粘菌素琼脂：见 A1 。 1 食品标准网（/ ） 3.2 戊烷脒多粘菌素琼脂：见 A2 。 3.3 营养肉汤：见 A3 。 3.4 营养琼酯：见 A4 。 3.5 洗样液：见 A5 。 3.6 生理盐水：见 A6 。 3.7 缓冲生理盐水：见 A7 。 3.8 固定液：见A8 。 3.9 炭疽杆菌噬菌体：见 A9 。 3.10 革兰氏染色液：见 A10 。 3.11 大豆凝集素稀释液：见 A11 。 4 抽样 4.1 鬃、毛、绒、生骨粒 4.1.1 抽样数量 按生产日期或原料来源划分批次。每批按 30 ％开包(箱)抽样或在扎包(装箱)时由每包(箱)各 取一份样品。 4.1.2 抽样方法 用火焰灭菌的镊子或戴经消毒的乳胶手套从每包(箱) 的不同部位共抽样 3 ～5g,装入灭菌棉 布袋内,将袋口扎紧,作上批次标记。 4.1.3 送样 将样品装入塑料袋或铁桶内,密封后送样。 4.2 动物毛皮 4.2.1 抽样比例 逐张取样。 4.2.2 抽样方法 用灭菌棉拭子涂擦样皮的真皮面。将棉拭子插入试管,塞紧棉塞。 4.2.3 送样 将试管逐支用纸包裹,装入铁桶内,再用棉花或软纸填充空隙,密封后送样。 5 样品处理 2 食品标准网（/ ） 5.1 鬃、毛、绒、生骨粒 5.1.1 根据样品多少将适当数量的同批样品(最多不超过 10 份)合编为一个检验样品单位,作 好记录。 5.1.2 从合编为一个检验样品单位的每个样品袋中各取 1～2g 样品,一起放入一个适当大小 的灭菌三角烧瓶中。 5.1.3 加样品量 30～40 倍(W/V)的预冷洗样液于三角烧瓶,用灭菌胶塞将瓶口塞严。 5.1.4 将三角烧瓶放入冰水浴或 0～4 ℃冰箱内,间或摇动约 1h 。 5.1.5 将瓶中洗样液倒入 500mL 灭菌离心管内,盖住管口, 以3000r/min 离心 20min 。 5.1.6 弃去上清液(注意防止污染),加少许灭菌水,使沉淀均匀悬浮。 5.1.7 将离心管静置 5～10min,待杂质下沉后,将上悬液移入