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- 2019-07-04 发布于广东
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第二篇 分析方法
第五章 光谱分析法
第一节 比色法
1)定义 紫外-可见光通过某种物质时,一部分光被吸收,从而引起该物质分子的外层电子能级跃迁。利用被测物质在特定波长或一定波长范围内的吸收度来测定药物的含量。又称吸收光度法。
2)定量方法
A:λ范围400-760nm可见。定量依据 A=E·C·L
B:是用于待测物本身有颜色或能与显色剂作用显色的被测组分,体内药物分析易受内源性杂质干扰。; C:生物样品采用标准曲线法
D:检测灵敏度低,大于1μg/ml的生物样本;选择性差,代谢
物和内源性物质干扰测定
第二节 紫外分光光度法
一.概述
A:λ范围200-400nm可见。定量依据 A=E·C·L
B:是用于有紫外吸收的药物,灵敏度略高于比色法
C:需经样品的萃取、纯化才能得到好的分析效果
二.方法与应用
1.直接紫外分光光度法
A:样品中的杂质在测定λ处无干扰
B:生物样品中待测物的浓度较高,达到检测限; 2.差示分光光度法
1)基本原理 简称△A法
在两种不同的环境中,待测物以不同的分子形式存在,其吸收光谱有明显的区别。而共存的物质不受这种环境变化影响,吸收光谱无变化。
2)测定方法
A:两份相同的共试品溶液,经过不同的处理后,一份置于样品池中,一份置于参比池中测其差值(△A)
B:波长λ的选择,
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