附录ⅩⅣ生物检定统计法.pdf

附录ⅩⅣ 生物检定统计法 一、总则 生物检定法是利用药物对生物体或其离体器官组织等所起的药理作用来检定药物效价的方法， 用于无适当理化方法进行检定的药物。生物体包括整体动物、离体组织、器官、细胞和微生物等评 估药物生物活性的一种方法。它以药物的药理作用为基础，以生物统计为工具，运用特定的实验设 计在一定条件下比较供试品和相当的标准品或对照品所产生的特定反应，通过等反应剂量间比例的 运算或限值剂量引起的生物反应程度，从而测定供试品的效价、生物活性或杂质引起的毒性。 生物检定统计法主要叙述应用生物检定时必须注意的基本原则、一般要求、实验设计及统计方 法。有关品种用生物检定的具体实验条件和要求，必须按照该品种生物检定法项下的规定。 生物检定标准品 凡中国药典规定用生物检定的品种都有它的生物检定标准品( Ｓ) 。Ｓ都有标 示效价，以效价单位（u ）表示，其含义和相应的国际标准品的效价单位一致。 供试品 供试品（Ｔ）或（Ｕ）是供检定其效价的样品，它的活性组分应与标准品基本相同。 Ａ 或Ａ 是Ｔ或Ｕ的标示量或估计效价。 T U 等反应剂量对比 生物检定是将Ｔ和其Ｓ在相同的实验条件下同时对生物体或其离体器官组 织等的作用进行比较，通过对比，计算出它们的等反应剂量比值( Ｒ), 以测得Ｔ的效价Ｐ 。 T Ｒ是Ｓ和Ｔ等反应剂量（ｄ 、ｄ ）的比值，即Ｒ＝ｄ ／ｄ 。 Ｓ T Ｓ T Ｍ是Ｓ和Ｔ的对数等反应剂量（ｘ 、ｘ ）之差，即Ｍ＝lg ｄ －lg ｄ ＝ｘ －ｘ 。Ｒ＝antilg Ｓ T Ｓ T S T Ｍ。 Ｐ 是通过检定测得Ｔ的效价含量，称Ｔ的测得效价，是将效价比值( Ｒ)用Ｔ的标示量或估计 T 效价Ａ 校正之后而得，即Ｐ = Ａ ·Ｒ或Ｐ＝Ａ ·antilgＭ。 T T T T T 检定时，Ｓ按标示效价计算剂量，Ｔ按标示量或估计效价 ( Ａ )计算剂量,注意调节Ｔ的剂量或 T 调整其标示量或估计效价，使Ｓ和Ｔ的相应剂量组所致的反应程度相近。 生物变异的控制 生物检定具有一定的实验误差，其主要来源是生物变异性。因此生物检定必 须注意控制生物变异,或减少生物变异本身,或用适宜的实验设计来减小生物变异对实验结果的影 响，以减小实验误差。控制生物变异必须注意以下几点。 (1)生物来源、饲养或培养条件必需须均一。 (2)对影响实验误差的条件和因子，在实验设计时应尽可能作为因级限制，将选取的因级随机 分配至各组。例如体重、性别、窝别、双碟和给药次序等都是因子，不同体重是体重因子的级，雌 性雄性是性别因子的级，不同窝的动物是窝别因子的级，不同双碟是碟间因子的级,给药先后是次 序因子的级等。按程度划分的级（如动物体重）,在选级时，应选动物较多的邻近几级，不要间隔 跳越选级。 (3)按实验设计类型的要求将限制的因级分组时，也必须严格遵守随机的原则。 误差项 指从实验结果的总变异中分去不同剂量及不同因级对变异的影响后，剩余的变异成 ２ 分，用方差(s )表示。对于因实验设计类型的限制无法分离的变异成分,或估计某种因级对变异的影 响小,可不予分离者，都并入 s ２。但剂间变异必须分离。 误差项的大小影响标准误Ｓ 和可信限（ＦＬ）。 M 不同的检定方法和实验设计类型，分别按有关的公式计算 s ２。 可靠性测验 平行线检定要求在实验所用的剂量范围内，对数剂量的反应（或反应的函数）呈 直线关系，供试品和标准品的直线应平行。可靠性测验即验证供试品和标准品的对数剂量反应关系 是否显著偏离平行偏离直线，对不是显著偏离平行偏离直线（在一定的概率水平下）的实验结果, 认为可靠性成立,方可按有关公式计算供试品的效