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第二节 培养基及配制一 培养基的成分 *培养基的种类 *培养基的成分 *培养基的配制（一）培养基的种类按性质分:基本培养基----MS、MT、White等 完全培养基----基本培养基+其它成分按状态分:固体培养基----培养材料与培养基接触不充分、有毒物质、容易积累、污染局部、通气好 液体培养基----培养材料与培养基接触充分、有毒物质不容易积累、污染全部、通气不好 (二)培养基的成分*无机盐（大量元素、微量元素） *激素 *有机物质 *琼脂 *碳源 *水 用于植物细胞工程的培养基应含有植物细胞、组织生长所必需的各种营养成分，以满足植物正常生长发育的需要。 1、大量元素(C、H、O、N、P、S、K、Ca、Mg、Cl) N：通常是指硝态氮或铵态氮，而培养过程中常以硝态氮满足培养物对氮素的需要；或两者混合使用；有时以硝态氮为主，添加铵态氮满足酸性植物生长的需要；它不仅是植物生长必需，也是胚胎发生的必需因素之一；Ca：细胞壁稳定Mg：酶及辅酶的成分P：参与蛋白质和核酸的合成、光合作用等 2、微量元素(Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Co)  用量少(过多容易导致中毒)；一般浓度为10-5~10-7mol.L-1 ； 当某种营养元素缺乏时，细胞或组织培养所获得的植株表现出营养缺乏症。 3、激素 是培养基中不可缺少的关键物质，用量虽然少，但对愈伤 组织的诱导和器官分化起重要且明显的调节作用；（1）细胞分裂素作用：促进细胞分裂、器官分化、延缓器官衰老、增强蛋白质合成；抑制顶端优势,促进侧芽生长,显著改善其他激素的作用;种类：6-BA（6-苄基氨基腺嘌呤 ） KT（激动素） ZT（玉米素） 2-iP（2-异戊烯基腺嘌呤 ） TDZ（噻重氮苯基脲） CPPU（吡效隆） 作用强弱：TDZCPPU2-iP 6-BA KT （2）生长素作用：愈伤组织的形成、胚状体的产生和根的分化；更重要的是配合一定比例的细胞分裂素诱导腋芽及不定根的产生；种类： IBA（吲哚丁酸 ） IAA（吲哚乙酸 ） NAA（萘乙酸 ） 2,4-D（2，4-二氯苯氧乙酸 ）作用强弱比较：2,4-D NAA IBA IAA使用注意问题： 不同的生长素，在作用强弱方面有所差异，在作用效果方面也有不同；同一生长素对不同种类的植物的作用也不同，因此，在具体使用过程中，一定要注意； （3）其它生长调节物质作用：抑制愈伤组织形成，促进芽的形成种类： 赤霉素（ GA3 ）：打破休眠 脱落酸（ABA）：促进分化 多效唑（PP333）：壮苗 细胞分裂素与生长素的比例决定形态发生方向: 比例高时,细胞分裂素起主要作用，诱导芽的发生； 比例低时,生长素起主要作用，诱导根的形成。 4、有机物质（1）碳水化合物 用来作为碳源，包括糖类、醇类和有机酸。最常采用的碳源为蔗糖，用量在1%～5%。为了降低生产成本，在进行相关实验证实的前提下，也可用砂糖、葡萄糖、果糖代替。 另外，蔗糖长时间高温处理会发生焦糖化，形成蛋白黑素，抑制细胞生长。 （2）维生素 主要以各种辅酶的形式参与多种代谢活动，对生长、分化有促进作用。  Vit B1(硫胺素) Vit B6(盐酸吡哆醇) Vit B3(烟酸) Vit B5(泛酸钙) (以上物质促进细胞对培养基的反应,一般使用浓度为0.1~1.0mg.L-1) 肌醇（环己六醇,有助于活性物质发挥作用,提高Vit B1 的效果,从而促进外植体的生长,一般使用浓度为50~100 mg.L-1） (3)氨基酸CH(水解酪蛋白)、LH(水解乳蛋白)（500 mg.L-1) ：促进胚状体、不定芽形成Gly(甘氨酸)（ 2~3 mg.L-1) ：促进离体根的生长Asn(天冬酰胺)：有效氮源Ser(丝氨酸)、Gln（谷氨酰胺）：有利花药胚状体、不定芽分化 氨基酸是优良的有机氮源，可直接被细胞吸收利用。但使用氨基酸极易引起污染，故无特别需要，最好不用。 （4）、有机附加物麦芽提取物（5%）、 酵母浸出物（5%）、 椰子汁（椰乳10%）、番茄汁（5%~10%） 香蕉泥（100~20