产前诊断中绒毛、脐血、羊水取样与标本.pptVIP

产前诊断中心 南京鼓楼医院 脐血穿刺—排除脐血中母血污染 X染色体DMD基因内部5对CA重复序列的连锁分析 产前诊断中心 南京鼓楼医院 绒毛组织、羊水细胞、脐血细胞培养 产前诊断中心 南京鼓楼医院 绒毛组织的培养 直接法 培养法（悬浮培养、贴壁培养） 产前诊断中心 南京鼓楼医院 绒毛组织的染色体检查—直接法 孕早期Langhan’s细胞有较高的有丝分裂活性，能提供足以分析的良好有丝分裂相，较绒毛培养简易可靠、操作简单快速 产前诊断中心 南京鼓楼医院 绒毛组织的染色体检查—直接法 绒毛组织的分离洗脱 加秋水仙素（终浓度2ug/ml，可一次加，也可分次少量加） 37OC 5%CO2培养箱培养45分钟 低渗（1%枸橼酸钠低渗10分钟或1%枸橼酸钠和0.075mol/l 1：1低渗40分钟） 预固定（甲醇：冰醋酸 3：1）10分钟 固定（甲醇：冰醋酸 3：1）10-20分钟 冰醋酸解离绒毛细胞（轻吹打） 制片 产前诊断中心 南京鼓楼医院 绒毛组织的染色体检查—悬浮培养法 绒毛挑选洗脱 绒毛组织剪成小块入培养瓶（25ml培养瓶每瓶10mg） 加特定培养液3ml 培养3-6天 收获（加秋素、低渗、固定、制片） 产前诊断中心 南京鼓楼医院 绒毛组织的染色体检查—贴壁培养法 绒毛组织挑选洗脱 绒毛组织剪成小块 加0.25%+0.02%EDTA 5ml 37OC 摇床中20分钟 加培养基终止