miRNA封闭海绵的构建与应用-检验医学.PDF

·１７８· 检验医学２０１４年２月第２９卷第２期　ＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｆｅｂｒｕａｒｙ２０１４，Ｖｏｌ２９．Ｎｏ２． 文章编号：１６７３８６４０（２０１４）０２０１７８０４　　中图分类号：Ｑ５０３　　文献标志码：Ａ　　ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３８６４０．２０１４．０２．０２１ ｍｉＲＮＡ“封闭海绵”的构建与应用 李　凤 综述，　李　智 审校 （同济大学附属第十人民医院检验科，上海２０００７２） 　　摘要：微小ＲＮＡ是一类非编码的小分子ＲＮＡ，通过参与基因的转录后水平表达调控，调控机体的多种生理 与病理进程。微小ＲＮＡ（ｍｉｃｒｏＲＮＡ，ｍｉＲＮＡ）“封闭海绵”是一类可以封闭特定ｍｉＲＮＡ的物质。“封闭海绵”通过 特定位点与ｍＲＮＡ的３′ＵＴＲ区结合来发挥封闭微小ＲＮＡ的作用。现有研究表明“封闭海绵”作为一种新型的 研究ｍｉＲＮＡ的方法在生物体内、外功能丧失研究中均优于目前的反义寡核苷酸抑制剂和基因敲除方法。随着 越来越多非编码ＲＮＡ的发现，“封闭海绵”在研究其功能上有着不可或缺的作用。本研究对近年在“封闭海绵” 的构建与应用方面的研究作一综述。 关键词：微小ＲＮＡ；“封闭海绵”；基因调控 　　ＥｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｍｉＲＮＡｓｐｏｎｇｅｓ　ＬＩＦｅｎｇ，ＬＩＺｈｉ．　（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ， ＴｅｎｔｈＰｅｏｐｌｅ′ｓＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＴｏｎｇｊｉＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０００７２，Ｃｈｉｎａ） 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＭｉｃｒｏＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）ｉｓａｋｉｎｄｏｆｎｏｎｃｏｄｉｎｇｓｍａｌｌＲＮＡｗｈｉｃｈｐａｒｔｉｃｉｐａｔｅｓｉｎｐｏｓｔｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｍｏｄｕｌａｔｉｏｎａｎｄｉｎｖｏｌｖｅｓｉｎｖａｒｉｏｕｓｋｉｎｄｓｏｆｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｐｒｏｃｅｓｓｅｓ．ｍｉＲＮＡｓｐｏｎｇｅｓｃａｎ ｓｅｑｕｅｓｔｅｒｓｐｅｃｉｆｉｃｍｉＲＮＡ．ｍｉＲＮＡｓｐｏｎｇｅｓｃａｎｂｉｎｄｔｏｓｐｅｃｉｆｉｃｓｉｔｅｓｉｎｔｈｅ３′ｕｎｔｒａｎｓｌａｔｅｄｒｅｇｉｏｎ（ＵＴＲ）ｏｆｍＲＮＡｔｏ ｓｅｑｕｅｓｔｅｒｍｉＲＮＡ．Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈａｎｔｉｓｅｎｓｅｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓａｎｄｇｅｎｅｔｉｃｋｎｏｃｋｏｕｔｓ，ｍｉＲＮＡｓｐｏｎｇｅｓａｒｅ ｖａｌｕａｂｌｅｔｏｏｌｓｆｏｒｍｉＲＮＡｌｏｓｓｏｆｆｕｎｃｔｉｏｎｓｔｕｄｉｅｓｉｎｖｉｔｒｏａｎｄｉｎｖｉｖｏ．ＷｉｔｈｍｏｒｅａｎｄｍｏｒｅｎｏｎｃｏｄｉｎｇＲＮＡｓｗｅｒｅ ｄｉｓｃｏｖｅｒｅｄ，ｍｉＲＮＡｓｐｏｎｇｅｈａｓａｉｎｄｉｓｐｅｎｓａｂｌｅｒｏｌｅｉｎｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｏｆｉｔｓｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ｔｈｉｓｒｅｓｅａｒｃｈｗｉｌｌｄｉｓｃｕｓｓｔｈｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｍｉＲＮＡｓｐｏｎｇｅｓ． 　　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＭｉｃｒｏＲＮＡ；Ｓｐｏｎｇｅ；Ｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ 　　微小 ＲＮＡ（ｍｉｃｒｏＲＮＡ，ｍｉＲＮＡ）是一类长约 酶ＩＩ转录成长达数百个或数千个碱基大小的初 ２０～２４个核苷酸的小分子非编码ＲＮＡ，其可以通 始转录子（ｐｒｉｍｉＲＮＡｓ）。初始转录子被含有Ｄｒｏ 过与特定ｍＲＮＡ结合或调节特定 ｍＲＮＡ的蛋白 ｓｈａ（核酸内切酶ＩＩＩ）和双链ＲＮＡ结合蛋白Ｐａｓｈａ ［１］ 质翻译过程来调控基因的表达 。越来越多的 的复合物剪切为６０～７０个的ｍｉＲＮＡ前体（ｐｒｅ ［３］ 数据显示，ｍｉＲＮＡ在多种人类疾病中表达异常。 ｍｉＲＮＡ） 。ｍｉＲＮＡ前体由小分子单体 Ｇ蛋白