第八章病毒的遗传分析.pptVIP

例题：有两个T4噬菌体的rⅡ突变体同时感染E.coli后裂解，将其裂解液稀释成6×10-7感染E.coli B菌株后做成平板，产生18个噬菌斑，另一种稀释液浓度为2×10-5感染E.coli K菌株，做平板得14个噬菌斑，请你计算此两个基因之间的重组值。 为比较B、K上的噬菌斑数目，由于稀释浓度不同，必须校正，所以在6×10-7稀释液中产生18个噬菌斑，则在2×10-5稀释液中产生的噬菌斑为： 18× 2×10-5 6×10-7 = 18×100/3 = 600 即相当于在2×10-5稀释液中可以产生600个噬菌斑。 因此，重组值 = 2×14/600 ×100% = 4.67% 8.3.2 T2突变型的两点测交与作图 检验噬菌体中基因重组的前提必须要有突变型，而不同突变型之间的基因重组首先是在噬菌体T2中发现的。 T2噬菌体突变型（ r－ ）是快速溶菌，产生大的、界限分明的噬菌斑，而野生型（ r＋ ）是缓慢溶菌产生小噬菌斑； 宿主范围突变型（ h－ ）能感染大肠杆菌品系1和品系2，产生透明的噬菌斑，而野生型（ h＋ ）只能感染品系1，因为品系2的细胞表面能阻止T2噬菌体对它的吸附。 所以把T2噬菌体接种到大肠杆菌品系1和2的混合培养物上时，噬菌斑是半透明的。 将h＋ r－ 与h－ r＋ 同时感染大肠杆菌品系1，两种噬菌体都可以在品系1细菌细胞中进行增殖，同时也可能发生重组。 为了检验这两个基因位点之间是否发生重组，将其子代噬菌体再去侵染大肠杆菌品系1和品系2的混合培养物，结果出现4种而不是2种噬菌斑，既有亲本类型：大而半透明的h＋ r－ 和 小而透明的 h－ r＋ ；还有重组类型：小而半透明的 h＋ r＋ 和大而透明的h－ r－ 分别统计各种噬菌斑的数目，由此计算出重组值，去掉% ，作为图距进行作图。 不同速溶性噬菌体的突变在表型上不同，可分别写成ra－、rb－、rc－等，用h＋rx－×h－rx＋获得的试验结果如下： 根据表8-5结果可以分别作出以下ra、rb 、rc与h之间的3个顺序： 由于有3个不同的r基因，故可根据表8-5的重组值列出以下4种可能的基因排列连锁图： 我们如何选出正确的排列？ 首先只考虑rb，rc和h rc-h-rb h-rc-rb 要进行rc － rb+ × rc+rb －的杂交，得到的重组值与rb-h间的距离进行比较，若rc-rb＞12.3=rb-h，则h位于中间，即排列顺序为rc-h-rb。 剩下的是ra在h的哪一边？ 这需做广泛的遗传学作用， 答案是ra-rc-h-rb和rc-h-rb-ra都正确， 因为T2噬菌体的连锁图也是环状的。 ？ 8.3.3 λ噬菌体的基因重组与作图 Kaiser 1955年最早进行了λ噬菌体的重组作图试验。他用紫外线照射处理得到5个λ噬菌体的突变系： s 系产生小噬菌斑 mi系产生微小噬菌斑 c 系产生完全清亮的噬菌斑 co1系产生除中央一个环之外其余部分都清亮的噬菌斑 co2系产生比co1更浓密的中央环噬菌斑。 Kaiser用s co1 mi ×＋＋＋杂交，所得后代有8种类型。病毒是单倍体，与二倍体生物不同，亲本组合与重组交换的组合可直接从后代中反映出来。8个类型中数目最少的两种类型就是双交换的结果，频率最高的两种是亲本类型，其余的为单交换类型。结果及分析作图可归纳于表8－6。 从双交换的类型可知，这3个基因的次序就是s－co1－mi s与co1的图距应为3.83 cM；co1 与mi之间则为6.21 cM；因为有双交换的存在，s与mi之间的图距则为8.32＋2×0.86＝10.04 3个基因的遗传图: 8.3.4 T4 突变型的三点测交与作图 采用三点测交的方法，在噬菌体中同样可进行基因定位。用T4噬菌体的两个品系感染E. coli。一个品系:m r tu（小噬菌斑、快速溶菌浑浊溶菌斑）突变型。另一个品系对这3个性状都是野生型（＋＋＋）的。三点测交结果见表8－7： 根据上述结果，可绘出这3个基因的染色体图： 并发系数 = 0.033/（0.129 × 0.208）= 1.2 并发系数大于1，为负干涉。 其主要原因在于： （1）与噬菌体DNA结构特点相关（裸露，不与组蛋白结