东南大学12-6-5 生化制药.docVIP

名词解释题（每题2分，共10分） 填空题（每空1分，共30分） 简答题（每题8分，共40分） 翻译题 （每题10分，共20分） PCR（Polymerase Chain Reaction）法，又称为聚合酶链式反应或PCR扩增技术，是一种高效快速的体外DNA聚合程序。 基因文库（gene library or gene bank）从特定生物个体中分离的全部基因，这些基因以克隆的形式存在（人工构建）。 将外源基因与受体菌自身的蛋白质编码基因拼接在一起，并作为一个开放型阅读框架进行表达。由这种杂合基因表达出的蛋白质称为融合蛋白。 细胞转化指细胞发生遗传改变而产生永生化，即由限定性细胞系转化为连续性细胞系，可以在体外进行无限传代和生长繁殖 。 单域抗体即为VH，约为完整分子的1/12。它只由一个结构域构成，故称单域抗体。单域抗体尽管亲和力有所降低，但仍保持着原单抗的特异性。 转基因动物(transgenic animal）是通过基因工程技术将外源DNA导入动物生殖细胞，干细胞，早期胚胎，并在染色体上整合，稳定传给子代的技术，转基因技术诱导基因组改变的动物称转基因动物。 动物生物反应器（bioreactor）是目的片段在器官或组织中表达的转基因动物。包括乳腺生物反应器，血液生物反应器和膀胱生物反应器等 固定化酶（immobilized enzyme） 指限制或固定于特定空间位置的酶。即经物理或化学方法处理，使酶变成不易随水流失即运动受到限制，而又能发挥催化作用的酶制剂。 次级代谢产物（Secondary metabolites） 通过次级代谢合成的产物，大多是分子结构比较复杂的小分子化合物，如抗生素、激素、生物碱、毒素等。多具有生物活性，是植物代谢产物研究的重点。 外植体(explant) 植物体上取出的用于培养和分离细胞的组织或器官。 愈伤组织 植物的伤口或外植体的伤口长出的细胞团，既是组织，又是脱分化细胞 通过在DNA水平上人工设计引入的蛋白酶切割位点或化学试剂特异性断裂位点，可以在体外从纯化的融合蛋白分子中释放回收异源蛋白。 供体、受体、载体是重组DNA技术的三大基本元件。 载体的功能包括运送外源基因高效转入受体细胞、为外源基因提供复制能力或整合能力、为外源基因的扩增或表达提供必要的条件。 基因工程转化细胞的筛选方法有抗生素筛选法、篮白斑筛选法、噬菌斑筛选法。 基因工程转化细胞的鉴定方法有菌落PCR、载体大小检测、酶切鉴定、测序确证。 选择剂是维持工程菌的纯正性和质粒的稳定性的化合物。包括营养缺陷互补和抗生素抗性。 对于诱导表达型工程菌，Lac启动子表达系统利用IPTG诱导。甲基营养型酵母通过加入甲醇进行诱导。 组织工程三要素是指种子细胞、 支架材料、 生长因子。 已分化的植物细胞要表现全能性，首先要脱分化形成分生细胞，然后再分化形成胚胎发育成植株。脱分化条件为创伤和外源激素 甾类药物和抗生素发现及成功合成被誉为半个世纪来医药工业取得最引人注目的两大进展之一。它们都是含有环戊烷多氢菲核的化合物。 其生产工艺比较复杂，大多是化学合成和微生物转化相结合的工艺路线。 评价固定化酶（细胞）的指标包括固定化酶活力、偶联率、半衰期、热稳定性等。 单加氧酶和双加氧酶直接在底物分子中加氧；氧化酶催化底物脱氢，脱下的氢再与氧结合生成水或过氧化氢；脱氢酶催化底物脱氢，但其催化脱下的氢与氧化态NAD(P)+结合，然后还原型NAD(P)H再通过呼吸链或NAD(P)H氧化酶将电子最终交给氧并生成水。 氧化反应本质是电子的得失。 酯酶、脂肪酶和蛋白酶是生物催化手性合成中最常用的水解酶。 甾体生产的关键中间体是雄甾-1, 4-二烯-3, 17-二酮(ADD)、雄甾- 4-烯-3, 17-二酮(AD)和3-氧联降胆甾-1,4-二烯-20酸(BDA)等。 11α-羟化是微生物转化甾体的最重要反应，将皮质类激素羟基化可增加其抑制炎症的效应。 甾体化合物羟基化反应中，转化到甾体上的羟基是直接取代原来碳骨架上的氢的位置，并且在取代过程中并没有发生立体构象的改变。羟基化反应的氧是来自空气中的氧。 发酵过程pH变化的原因有哪些? 产物形成 某些产物本身呈酸性或碱性，使发酵液pH变化。如有机酸类产生使pH下降，红霉素、洁霉素、螺旋霉素等抗生素呈碱性，使pH上升。 菌体自溶，pH上升，发酵后期，pH上升 糖代谢：特别是快速利用的糖，分解成小分子酸、醇，使pH下降。糖缺乏，pH上升，是补料的标志之一。 氮代谢：当氨基酸中的-NH2被利用后pH会下降；尿素被分解成NH3，pH上升，NH3利用后pH下降；当碳源不足时，氮源当碳源利用pH上升。 生理酸碱性物质利用后，pH上升或下降。 发酵过程的pH控制的方法有哪些？ 调节好基础料的pH。