DB34_T 1-3-6-4-2011 饲料中甲基睾丸酮的测定—高效液相色谱法.pdfVIP

ICS 65.120 B 46 DB34 安 徽 省 地 方 标 准 DB 34/T 1364—2011 饲料中甲基睾丸酮的测定-高效液相色谱法 Determination of Methyltestosterone in feed -High performance liquid chromatography 2011 - 03 - 16 发布 2011 - 04 - 16 实施 安徽省质量技术监督局 发 布 DB34/T 1364—2011 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由安徽省畜牧兽医局提出。 本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：安徽省兽药饲料监察所(安徽省畜产品质量安全检测中心)。 本标准主要起草人：刘发全、丁在亮、张莉、许世富、刘红云、明文庆、蔡东东。 I DB34/T 1364—2011 饲料中甲基睾丸酮的测定-高效液相色谱法 1 范围 本标准规定了以高效液相色谱（HPLC）测定饲料中甲基睾丸酮的方法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和预混合饲料中甲基睾丸酮的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 14699.1 饲料 采样 3 试样制备 按 GB/T 14699.1 采样，选取有代表性的饲料样品 500ｇ，四分法缩减至 100ｇ，磨碎，全部通过 0.42 mm 孔径分析筛，混匀，装入密闭容器中，避光低温保存备用。 4 原理 试样中的甲基睾丸酮先用甲醇溶液提取，固相萃取柱净化，用高效液相色谱仪测定，以外标法进行 定量分析。 5 试剂和材料 5.1 除特殊说明外，本标准所用试剂均为分析纯，水为符合 GB/T 6682 规定的二级水。 5.2 甲基睾丸酮标准品：纯度不低于 98％。 5.3 甲醇，色谱纯。 5.4 磷酸。 5.5 0.025 mol/L磷酸溶液：量取 1.8 mL磷酸加水定容至 1000 mL。 5.6 提取液：甲醇：水=95:5。 5.7 洗脱液：甲醇：水=40:60。 5.8 固相萃取柱：中性氧化铝固相萃取柱 150 mg/6 mL。 5.9 甲基睾丸酮标准贮备液：500 μg/mL。准确称取 50 mg 甲基睾丸酮标准品(精确至 0.0002 g 于 100 mL 棕色容量瓶中，用甲醇常温超声溶解，定容至刻度并摇匀，配制成标准贮备液，贮于 4℃ 冰箱 中，有效期 90 天。 1 DB34/T 1364—2011 5.