色谱柱使用规程as11.docVIP

标题 正文 1．领取色谱柱 2. 常规运行条件 3. 色谱柱使用限度 4.淋洗液化学纯度的要求 5.淋洗液的配制 5.1配制氢氧化钠淋洗液 5.2含有机溶剂淋洗液的配制 6.含有机溶剂淋洗液使用要求 7.色谱柱的保养 7.1推荐最大运行压力 7.2色谱柱的启用 7.3色谱柱的储存 7.4色谱柱的清洗 7.4.1 7.4.2 1.1根据从事的分析研究项目的实际要求，领取色谱柱后，进行登记。 1.2仔细阅读说明书，熟悉该柱的类型、使用范围，性能以及使用、保存、再生方法等内容 1.3根据说明书的规定方法，对领取色谱柱进行柱效测试。 取样容积： 定量环25μL + 进样阀死体积0.8μL 色谱柱： AS11 4mm 分析柱 + AG11 4mm 保护住 淋洗液： 12mM NaOH 抑制器： 阴离子自再生抑制器 (ASRS ULTRA) 抑制器循环模式：抑制再循环模式 预期背景电导： ≤8 μS 标准流速： 1.0 mL/min 标准压力： ≤1 000psi（7.58MPa） 存储液： 100 注意：淋洗液必须过滤并除气，样品必须过滤！ 淋洗液pH范围：0～14 样品pH范围： 0～14 色谱柱最大流速：3.0mL/min 系统压力限度：200～3000 Psi 应尽可能应用最高纯度的化学试剂、溶剂和去离子水来配制淋洗液 无机化学药品：优级纯（符合或高于美国化学学会ACS标准，可参见药品标签） 去离子水：Ⅰ型试剂级纯度（电阻率 18.2 MΩ·cm ，应无离子杂质、有机物和大于0.2μm的颗粒性物质）。瓶装色谱纯的水不可应用（BurdickJackson试剂除外）。 有机溶剂：尽可能应用纯度级别高的溶剂（如BurdickJackson超高纯度溶剂、Fisher科技Optima，有关有机溶剂的详细要求参见条目5）。 按表1，取所需量50%NaOH溶液，用除气去离子水（电阻率 18.2 MΩ·cm）定容至1000mL容量瓶中，得到对应浓度NaOH淋洗液。 避免向50%NaOH或去离子水中引入空气中的CO2，切勿振摇50%NaOH，且不要在溶液顶部吸取溶液。 建议采取称量质量法来取NaOH溶液，例如： 配制1L 12mM NaOH淋洗液，称取 50%NaOH质量= 稀释至1L 也可以量取一定体积的NaOH溶液，如下公式： g=dvρ g:所需NaOH质量 d：NaOH浓缩液的密度 v：量取NaOH浓缩液体积 ρ：NaOH浓缩液的纯度（%） 应按体积比混合配制，如下例： 配制含乙腈90%淋洗液，先向淋洗液贮器中加入900mL乙腈，然后加入100mL去离子水。 注意： 不要过度清洗或除气含溶剂的淋洗液。 除气和贮存含溶剂淋洗液应在氦气保护的塑料贮器中操作，不可用氮气。 使用含乙腈的碱性淋洗液时，应将乙腈与碱性淋洗液分开存放，以免淋洗液被乙腈的水解产物污染，使用时再用梯度泵按适度比例泵入淋洗液中。 安全事项： 不可将乙腈直接加入含碱性碳酸盐或氢氧化物淋洗液贮器中。 表1 用于IonPac AS11的色谱溶剂 溶剂 最大浓度 乙腈 100% 甲醇 100% 2-丙醇 100% 四氢呋喃 20% 例如： 配制1L 12mM NaOH淋洗液，量取 50%NaOH体积= 由于NaOH淋洗液易吸收CO2，故建议用注射器量取溶液，有利于防止碳酸盐的污染，非要用称量皿称取时，不要倾倒。 表2 50%（w/w）NaOH配制AS11淋洗液的量取标准 50%NaOH g(mL) 淋洗液中NaOH浓度（mM） 0.08(0.0525) 1 0.40(0.262) 5 0.96(0.63) 12 8.00(5.25) 100 16.00(10.5) 200 AS11可适用通常的色谱溶剂（浓度范围0～100%） 有机溶剂与水应提前混合 保证所有的无机化学药品在高浓度有机溶剂淋洗液中可溶 应用纯度级别尽可能高的溶剂 有机溶剂种类、浓度和淋洗液离子强度及流速会影响色谱柱回压，应用时AS11实际回压应不超过4000psi（27.57Mpa） 注意： 应用含有机溶剂的淋洗液时，抑制器要在自动抑制外部水模式下工作。 ≤3000psi 色谱柱封存的淋洗液为色谱柱测试时使用的淋洗液。 将色谱柱安装到仪器色谱模块上，按照色谱测试指明的条件下配制淋洗液，并测试色谱柱的性能，连续进行被测标准品的测试，直到色谱保留时间能够重现。当色谱保留时间能够连续的重现时，说明色谱柱已经平衡好。 短期和长期储存都用100mM硼酸钠作储存液，用储存液冲洗柱子至少10分钟，用柱子自带的堵头封住两端。 分三种方案：除酸性可溶物、碱性可溶物和有机污染物，可合并为一个梯度方法，但应注意： 清洗过程中淋洗液的交替，要避免造成局部高压