仪器分析3 紫外可见光谱课件.ppt

3.4.1 仪器测量条件 （仪器的测量误差） 选择合适入射光波长 透光率读数对测量结果的影响（选择合适的吸光度读数范围） 如何选择合适入射光波长 应用“最大吸收原则”，在此波长（λmax）下测定，吸光系数大，灵敏度高。 当在最大吸收波长处有干扰物存在时，可根据“吸收尽可能大，干扰尽可能小的原则”选择入射光波长。 任何分光光度计都有一定的测量误差。 （这种误差来源于光源、检测器、显示系统） 这一误差最终表现在透光率读数T上，设为?T 对同一台仪器来说 ，?T 是一常数。测量结果的误差用?c/c来表示 。 透光率读数对测量结果的影响 （选择合适的吸光度读数范围） ?c/c 与 A 、T 的关系 A = -lgT = εl c （1） (-0.434/T)dT=εl dc （2） 将（2）式代入朗伯-比尔定律，整理后得： 0.434 （3） TlgT ?c/c = ?T ?c/c与 T、A 的关系 ?c/c 36.8% T ?c/c = 0.434 TlgT ?T 0.434 (A) min ?T=0.5% 1. ?c/c 取决于透光率T和透光率测量误差?T的大小; 当 T=36.8%时 (或A=0.434)，?c/c最小。 2. 当 T 读数在 70% ～ 10% , 即 A 读数0.15～ 1.0 范围时, ?c/c 较小，并且变化不大。 3.4.2 反应条件的选择（可见分光光度法反应条件的选择） 显色反应：使待测物与显色剂作用，生成有颜色的化合物，颜色深浅与待测物浓度相关，在一定范围内呈直线关系。A =εl c 目的：使被测组分在所选择反应条件下能有效地转变为适于吸光度测定的化合物形态。 对显色反应的要求 反应有较高的选择性，生成物在紫外-可见光区有较强吸光能力。 生成物组成恒定，与被测物之间必须有确定的定量关系，稳定性好，显色条件易于控制。 对照性要好，显色剂与生成物的最大吸收波长差别要在 60 nm 以上。 反应条件的选择与控制（影响显色反应的因素） 显色反应 ：M + nR MRn 1. 显色剂用量：作吸光度随显色剂浓 度变化曲线，选恒定吸光度值时的 显色剂用量。 反应条件的选择（影响显色反应的因素） 2. 酸碱度的影响：介质酸度直接影响显色剂离解程度，从而影响显色反应的完全程度。 固定溶液中待测组分与显色剂的浓度，改变溶液酸度（pH值），测定溶液A与 pH 的关系曲线，找出最适 pH 范围。 反应条件的选择（影响显色反应的因素） 3.其他问题 反应的时间、温度、放置时间等。 此外，加显色剂和试剂的顺序与实验成败有重要关系！ 反应条件的控制需注意的问题 必须通过实验确定显色反应最适宜条件。 对于已制定的比色方法，不应随意更改条件。 需要改变条件，或新建方法中要考察某一条件对显色的影响时，可通过条件实验，描绘吸光度-条件曲线，或不同条件下的吸光度-浓度曲线，从中选择适宜条件。 3.4.3 参比溶液的选择 溶剂参比：待测试样组成简单，共存组分少且对测 定波长几乎无吸收，可用溶剂做参比。 试剂参比：在不加样品的条件下，加入所需试剂 和溶剂。 试样参比：除不含显色剂以外，其余成分都含有。 平行操作参比：不含待测组分。 3.4.4 干扰及消除方法 干扰物的影响： 干扰物本身有颜色或与显色剂形成有色化合物； 在显色条件下，干扰物水解，析出沉淀使溶液浑浊； 与待测离子或显色剂形成更稳定的配合物，使显色反应不能进行。 3.4.4 干扰及消除方法 消除方法： 控制酸度，提高反应的选择性； 选择适当的掩蔽剂，但不能与待测离子作用； 与待测物生成惰性配合物； 选择适当的测量波长； 分离。 3.5 紫外-可见吸收光谱的应用 紫外-可见吸收光谱适用于不饱和有机化合物，尤其是共轭体系的鉴定，以此推断未知物的骨架结构。 利用紫外-可见吸收光谱进行化合物的定性鉴别，一般采用比较吸收光谱特征的方法。 3.5.1 定性分析（鉴别） 3.5 紫外-可见吸收光谱的应用 3.5.1. 定性分析（鉴别） 1.对比吸收光谱特征数据：λmax,ε或A1cm1% 3.5.1. 定性分析 2. 对比吸