现代仪器分析各章习题总结.docVIP

第一章、绪论 1、了解分析化学发展的过程 阶段一：16世纪天平的出现，分析化学具有了科学的内涵 20世纪初，依据溶液中四大反应平衡理论，形成分析化学理论基础。 第一次变革，20世纪40年代前，化学分析占主导地位，仪器分析种类少和精度低。 阶段二：20世纪40年代后，仪器分析的大发展时期 第二次变革，仪器分析的发展。 阶段三：八十年代处初，以计算机应用为标志的分析化学第三次变革 2、掌握仪器分析的分类和发展特点 分类：电化学分析法、光学分析法、色谱 分析法、其它仪器分析法。 发展特点：提高灵敏度， 解决复杂体系的分离问题， 微型化及微环境的表征与测量， 扩展时空多维信息， 形态、状态分析及表征， 生物大分子及生物活性物质的表征与测定， 非破坏性检测与遥测， 自动化及智能化。 3、分析仪器的性能应从哪些方面进行评价？ 精密度：标准偏差、相对标准偏差、方差、变异系数 误差：绝对误差、相对误差 灵敏度：校正灵敏度、分析灵敏度 检测限：空白加3倍的空白标准偏差 线性范围：可以分析的浓度范围 选择性：选择性系数 4、仪器分析常用的校正方法？各有何特点？ 标准曲线法：标准物配制浓度要准确，标准基体与样品基体一致 标准加入法：基体相近，基体干扰相同，但适用于小数量的样品分析 内标法：克服或减少仪器或方法的不足等引起的随机误差或系统误差 5、了解分析仪器的组成部分 信号发生器——（分析信号）——检测器——（输入信号）——信号处理器——读出装置 6、内标元素和分析线对选择的条件？ 内标元素应是原来试样中不含或含量少的元素， 内标物的激发电位应与分析线相同或尽量相近， 内标元素的待测元素应具有相近的电离电位， 两条谱线的波长应接近， 分析线对附近的背景干扰应尽量小 第二章：离心与电泳技术 1、理解相对离心力场（g）和沉降系数（s）的物理意义。 相对离心力场：转头所产生的最大离心力场是重力场的多少倍。 沉降系数：单位离心力场的沉降速度。 迁移率：单位电场强度下电荷移动速率，取决于物质本身。 2、掌握梯度离心的原理、优点和梯度材料选择条件。 梯度离心的两个方法：速度梯度离心、等密度梯度离心。 速度梯度离心：依据样品不同组分沉降系数的不同而分离的方法。 等密度梯度离心：离心管中介质的密度梯度范围包括待分离样品中所有组分的密度，离心过程中各组分将逐步迁移 到与它本身密度相同的地方形成区带。（分离取决于组分之间的密度差） 优点：分辨力强， 梯度液可抗对流、扰动和扩散， 可同时分离几种不同的组分。 梯度材料选择条件：要有合适的密度范围， 所有梯度材料应不影响样品的生物活性， 离心后便于与样品组分分离， 不腐蚀离心管和转头， 价格便宜、便于回收利用。 3、了解影响荷电分子迁移速率的因素 样品分子性质---------（样品分子的直径、形状、荷电荷数） 电场强度---------------（E越大，泳动速度越快） 溶液PH----------------（决定荷电分子的解离程度，决定荷电种类和电荷量，因此决定移动方向和速度） 溶液的离子强度------（过小会降低泳动速率，过大会增大电泳过程中的发热量，使区带扩散变形） 电渗---------------------（对样品形成一股除电场外额外的冲击力） 焦耳热------------------（U变大，Q增大，可能破坏样品的支持介质） 筛孔---------------------（琼脂／聚丙烯酰胺） 4、理解各类凝胶电泳分离方法的原理 （1）琼脂糖凝胶电泳：用于分离、鉴定、分析纯化DNA片段，用EB染色，在紫外灯下观察。取决于浄电荷的性 质和数量、分子大小。 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳：电泳缓冲液中加入SDS，SDS能与蛋白质形成胶粒，胶粒外表面带负电荷，所有 电荷向正极移动，蛋白质分子在电泳中的迁移率仅取决于浄电荷数和分子大小。 （3）等电聚焦聚丙烯酰胺凝胶电泳：根据等电点分离和分析蛋白质，取决于环境溶液PH （4）密度梯度凝胶电泳：根据分子量分离和分析蛋白质，适用于测球形蛋白质分子量 （5）双向凝胶电泳：先将混合物放在直径1mm的玻璃凝胶中进行等电聚焦电泳，之后将凝胶条从毛细管中取出，