HepaCAM蛋白通过exosomes途径分泌到细胞外并抑制肿瘤细胞增殖.docVIP

PAGE PAGE 5 HepaCAM蛋白通过exosomes途径分泌到细胞外并抑制肿瘤细胞增殖 刘安全1，吴小候1，罗春丽2 (400016 重庆，重庆医科大学：第一医院泌尿外科1，重庆医科大学医学检验系2) [摘要] 目的 探讨肝细胞黏附分子（hepatocyte cell adhesion molecule,hepaCAM）在肾癌786-0细胞中通过 exosome途径分泌到细胞外及是否可以抑制肿瘤细胞增殖。方法 将携带hepaCAM基因的重组腺病毒质粒瞬时转染786-0细胞,Western blot鉴定hepaCAM基因在786-0中的表达；莫能星（monensin）和二甲基阿米洛利（DMA）处理转染后肿瘤细胞,检测肿瘤细胞上清液及exosomes中hepaCAM蛋白的量的变化。MTT法检测hepaCAM蛋白是否可以抑制肿瘤细胞增殖。结果 成功构建并转染hepaCAM重组腺病毒质粒，在肿瘤细胞上清液中检测到hepaCAM 蛋白的分泌，经药物处理后，莫能星明显增加了转染后肿瘤细胞的hepaCAM蛋白的分泌量，而二甲基阿米洛利处理转染后肿瘤细胞，能显著抑制细胞上清液中hepaCAM的分泌量。Western blot进一步证明hepaCAM 蛋白存在于exosomes上。成功转染hepaCAM基因的肾癌细胞分泌的exosomes明显抑制了肿瘤细胞增殖。结论 hep