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34 ( FENXI UAXUE) 5
2006 5 Chinese Journal ofAnalyticalChem istry 591~ 597
研 究报告
1 2 1 1 1 1
卢庄 王 杉 代景泉 王京兰 张养军 应万涛
2 1 2 * 1
徐友宣 钱小红 吴侔天 蔡 耘
1(, 100850)
2 (, 100029)
rhEPO , N
, 4 rhEPO ; ,
( PMF) 98%, 4N
, 4: 27754. 1 27. 4Da27941. 4 23. 2 Da27682. 5 22. 0 Da 27914. 7
22. 5 Da; : 5. 0%4. 8%5. 6% 5. 4%; : 34. 3%34. 7%34. 1%
346% 4ON
,, ,,N
,
1
(EPO) , , (
[ 1]
) ,,
1988EPOEPO( rhEPO),
,,,
, EPON EPO N
rhEPO , 1/500,
[2]
EPO,, rhEPO EPO
[3]
, rhEPO EPO ,
[4, 5]
rhEPO rhEPO
, EPO EPO,, rhEPO,
4 rhEPO , rhEPO
, N ,
( PMF),, 4 PMF
98% , rhEPO,
,N O ,, ,
2
2. 1
(No.(No. 2004CB520802, 2001CB510201)
(No. 030230280190)(No. 2002BA904B01, 2003BA904B05)
34
592
4700 proteomic analyzer GPS explorer ( ABI); SARTORIUS
BP211D, M illipore ( M illipore) ( PLC ,
J. T. Baker) ; (TFA)( iodoacetamide ,ACROS );
(DTT , dithiothreithol, Promega);Glu CN F(PNGaseF, SIGMA
); (2( 3, 6, 8, 9) Neuraminidase) ( Sigma); 4
( CCA, SIGMA); 1mol/L Tris Cl p 8. 0( USB); ziptip C ( M illipore);
18
Na PO Na PO ( rhEPO)(
2 4 2 4
)
2. 2
2. 2. 1 ( 1)不经还原烷基化直接酶解样品的制备 4 rhEPO
1. 2 g/L, 20 L, 100 mmol/L ( p 7. 8) 20 L G lu C 1 g, 37 18 h;
( 2)经还原烷基化再酶解样品的制备 4 rhEPO 1. 2 g/L, 20 L,,
10 L( 8mol/L, 20mmol/L Tris Cl, 5mmol/L DT
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