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- 2019-07-25 发布于浙江
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缺点:样品必须为晶体(单晶),但生物大分子结晶困难,特别是膜蛋白和病毒等分子组装体结晶更是困难. 其次对于像病毒那样大的分子组装体,测量其精细结构十分复杂. 原因有二: 一是大晶胞含有的原子极多,X射线衍射点极多,常常无法区分、辨认和探测; 其二是大晶胞所产生的衍射点强度过弱,特别在高分辨时,无法与背景区分. NMR也是测定生物大分子结构重要手段 基本原理:核磁共振现象( nuclear magneticresonance spectroscopy ,NMR) 1946 年由哈佛大学的伯塞( E.M.Purcell) 和斯坦福大学的布洛赫(F.Bloch) 所领导的2个小组,用不同的方法在各自的实验室里观察到的,伯塞尔使用的实验方法是吸收法,而布洛赫使用的是感应法. 利用物理原理,通过对核磁共振谱线特征参数的测定来分析物质的分子结构与性质。NMR 不破坏被测样品的内部结构,是一种无损检测方法。由于不同的原子核吸收不同的电磁波,因而通过测定和分析受测物质对电磁波的吸收情况就可以判定它含有哪种原子,原子之间的距离有多大,并据此分析出它的三维结构。 以蛋白质为例,它的二级结构如α螺旋,β折叠、转角、环形和卷曲等,体现了蛋白质分子主链原子在三维空间各种不同的排列规律性. 位于不同二级结构域的原子核间距,原子核间的相互作用以及多肽段的动态特性,都直接反映蛋白质三维结构的特征. 这
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