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细胞免疫学检测讲课教师 季育华 第一节 免疫细胞分离技术 人外周血(peripheral blood )白细胞分离 一、原理(principle)： 红细胞/白细胞比例不同（600～1000）：1，密度不同，沉降速度不同。 二、方法(method)： 1、自然沉降法 （直立静置RT30～60min，紧贴红细胞层上的白膜层） 2、聚合物加速沉降法 （加某些高分子物使RBC凝集成串加速沉降，如明胶） 人外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMC）的分离 聚蔗糖-泛影葡胺(ficoll-hypaque) 人外周血淋巴细胞(亚群)的分纯(purificcation) 人外周血单个核细胞（PBMC）主含淋巴细胞, 但混有 单核细胞、粒细胞、红细胞和血小板等。淋巴细胞的分纯： （一）红细胞的去除（0.83%氯化铵、蒸馏水） （二）血小板的去除（离心、洗涤） （三）单核、粒细胞的去除（黏附去除，羰基铁粉吞噬） （四）淋巴细胞亚群的分离★ 淋巴细胞亚群的分离 分离依据： 1、淋巴细胞不同亚群其细胞表面标志（ specific membrane molecule/surface marker） 2、淋巴细胞不同亚群其细胞分化抗原（antigen of cluster differentiation ；C