SDS–聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS–PAGE.pptVIP

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2019-07-19 发布于湖北
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SDS–聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS–PAGE.ppt

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操作过程（一）安装夹心式垂直板电泳槽（二）配胶及凝胶板的制备（三）样品的处理与加样（四）电泳（五）凝胶板剥离与固定（六）染色与脱色 ,观察结果具体过程见视频。试剂 1. 标准蛋白质（Mark）与待检测蛋白样品 2. 样品溶解液 3. 30%丙烯酰胺（丙烯酰胺Acr、甲叉双丙烯酰胺Bis） 4．凝胶缓冲液：SDS 0.2g，加0.2mol/L PH7.2磷酸盐缓冲液至100ml。 5. 1%TEMED（N，N，N–四甲基乙二胺） 6.10%过硫酸铵（AP） 7．电极缓冲液：0.1%SDS、0.1mol/L PH7.2磷酸盐缓冲液。 8．1%琼脂：琼脂1g，用上述缓冲液溶解至100ml 4℃保存。 9．固定液：甲醇：冰乙酸：水为1：2：7 10．染色液：考马斯亮蓝R–250 0.25g加上述固定液500ml，过滤后应用。脱色液：冰乙酸：甲醇：水为2：9：9 二器材 1．夹心式垂直板电泳槽。 2．电泳仪。 3．微量加样枪。 * * SDS–聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS–PAGE）