600分考点 700分考法（A版）2019版高考生物总复习 第十八章 基因工程课件.pptVIP

考点46 基因工程的工具及操作程序;考点46 基因工程的工具及操作程序;应试基础必备;;a.启动子：一段有特殊结构的DNA短片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA. b. 终止子：一段有特殊结构的DNA短片段，位于基因的尾端。 c. 标记基因：一般是抗生素抗性基因，用来筛选、鉴别受体细胞是否含有目的基因。 ③基因表达载体的构建方法;细胞类型;(4)目的基因的检测与鉴定;（1）PCR原理：DNA复制。 （2）PCR反应过程;（3）结果：上述三步反应完成后，一个DNA分子就变成了两个DNA分子，随着重复次数的增多，DNA分子就以2n的形式增加。PCR的反应过程是在PCR扩增仪中完成的。 ;;（1）黏性末端和平末端;（2）E·coliDNA连接酶与T4DNA连接酶的比较;（3）限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶等相关酶的分析比较;（1）切割目的基因和载体时要求用同一种限制酶的原因：产生相同的黏性末端。也可用不同的限制酶切割，但必须能产生相同的黏性末端。 （2）作为载体必须具有多个限制酶切点，而且每种酶的切点最好只有一个的原因：某种限制酶只能识别单一切点，若载体上有一个以上的酶切点，则切割重组后可能丢失某些片段，若丢失的片段含复制原点区，则进入受体细胞后便不能自主复制。一个载体若只有某种限制酶的一个切点，则酶切后既能把环打开接纳外源DNA片