不同酸度下提出苜蓿叶蛋白分析研究.docVIP

lm- 苜蓿叶蛋白的提取方法及展望 郑 力苜蓿被誉为“牧草之王”,为多年生宿根性草本植物，是世界著名优良牧草。它适应性强，产量高，适口性好且含有丰富的粗蛋白、矿物质及多种维生素，做为一种优良牧草已被广泛用于养殖业并被大力开发种植。但因为其含有皂素，青饲过多家畜易发生鼓胀病，故对苜蓿进行深加工，开发成各种苜蓿草产品一直受到人们的重视。1　苜蓿产业的兴起1.1　苜蓿产业的发展与现状目前世界苜蓿播种面积约3 300万公顷，美国种植苜蓿1 100万公顷，约占世界种植面积三分之一。中国苜蓿种植面积130万公顷，实际可利用面积60万公顷，广泛分布于西北、华北、东北地区。我国是世界上苜蓿品种资源较为丰富的国家之一，有苜蓿种属的13个种，如天蓝苜蓿、黄花苜蓿、罗马苜蓿、大花苜蓿、天山苜蓿、紫花苜蓿等。种草养畜已不再是苜蓿的唯一利用方式，草产品已成为商品进入国际、国内市场。除苜蓿草粉、草捆、草颗粒、草块这些草产品外，苜蓿食品等深加工产品也不断涌现如苜蓿汁饮料、苜蓿多糖保健品等），深受消费者喜爱。尤其是近年来我国政府推行退耕还草、还林的政策，使苜蓿种植业得到很大的发展，此举不仅可改善农业产业结构，扩大饲料资源，而且苜蓿根系发达在土壤中纵横交错，可拦截地表径流，防止冲刷，减少水土流失，在干旱地区种植苜蓿还可以防风固沙，防止土壤沙漠化，肥沃土地、恢复植被，保护生态环境。? 1.2　苜蓿的利用价值我国是蛋白饲料资源短缺的国家，目前蛋白饲料年缺口约为1 500万吨，据中国农科院饲料科学研究所有关专家预测，2018年和2020年我国蛋白饲料资源需求分别为6 000万吨和7 200万吨，饲料工业如果仅向现有的饲料资源等、靠、要，将不利于我国畜牧业的持续快速发展，应尽快找到丰富的蛋白资源。在当前苜蓿加工的新技术中有一种产品受到世界各国的普遍重视，这就是苜蓿叶蛋白，它是将苜蓿茎叶粉碎、压榨、凝聚、析出、最后干燥而形成的一种蛋白质浓缩物，其中蛋白质含量在38.31%～62.7%、粗脂肪6%～12%、无氮浸出物10%～35%、粗纤维2%～4%。苜蓿叶蛋白的开发利用有利于缓解我国目前蛋白饲料资源的紧张状态，充分利用苜蓿的潜在营养价值和提高其经济附加值。2　苜蓿蛋白的提取方法及特点我国苜蓿叶蛋白提取工作开始于20世纪90年代，虽然起步较晚，但起点高，在长期的探索中根据叶蛋白的不同性质总结了很多提取方法，主要有以下几类。2.1　利用蛋白的溶解性2.1.1　有机溶剂法有机溶剂法是在苜蓿茎、叶的汁液以下简称“汁液”）中加入乙醇、丙酮等有机溶剂，降低介电常数，使蛋白质沉淀析出。它可除去类脂化合物、叶绿素及类胡萝卜素等植物色素和导致叶蛋白有不良风味和颜色的多酚类物质，使其易干燥，消化率升高。缺点是操作复杂、投资大、成本高，难以规模化生产。2.1.2　加热法? 即将汁液直接进行加热得到絮凝物，通过离心分离得到粗蛋白的方法。其工艺如下：原料清洗→切碎打浆料水比为1：3）→榨汁滤布层数为2层）→加热85℃下恒温7min）→冷却→离心→沉淀→叶蛋白凝聚物干燥→叶蛋白制品。加热法叶蛋白的得率为4.70%，加热温度和叶蛋白中含氮物质、必需氨基酸和非必需氨基酸的含量以及叶蛋白的消化率都有极大的相关性。一般来说，温度越高，叶蛋白得率也越高。但是温度过高，对蛋白质的性质热变性）影响也越大。因此，用直接加热法提取叶蛋白时温度一般控制在80~90℃。其主要优点是操作方便、沉淀快、絮凝物结构紧密、易过滤收集；缺点是耗能大、成本高。2.1.3　盐析法盐析法是一种在高盐浓度下，使汁液中各种物质在不同浓度的盐溶液中分别沉淀析出，以达到分离纯化蛋白质的方法。取汁液放入烧杯中，然后用NH4）2SO4 调解溶液中NH4）2SO4的饱和度，再离心10min，沉淀用丙酮和重蒸水洗涤后在恒温105℃）干燥箱中干燥恒重。此法在常温下操作，具有简单安全的特点。加工出来的叶蛋白，虽然营养物质破坏少，但品质不够好，叶蛋白的得率和综合利用率都不高，因而经济效益受到限制。2.2　利用蛋白质的两性即酸、碱法：是利用蛋白质在等电点条件下或强碱作用下的变性沉淀。酸法是用HCl将汁液的pH值调节至4.0左右直至产生叶蛋白沉淀。它操作方便、节省能耗、成本低、沉淀快，可减少生物碱含量。但此类絮凝物结构疏松，不易过滤分离，还会加速不饱和脂肪酸的氧化，使胡萝卜素的损失增多。碱法则是用NaOH将pH值调节至强碱条件在10.0左右）以产生较好的絮凝效果。优点基本上与酸法相同，并可破坏多种不利因子，如某些酶类、植物雌激素和皂素等，但不如酸法使用方便和普遍。2.3　利用分子大小和形状差异如碱提膜过滤法：它是用具有良好透性和机械性能的高分子膜，依据渗透和超滤的原理，将鲜叶浆汁中的溶剂水）和溶质分子蛋白质）按分子