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- 2019-07-28 发布于天津
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高效液相色谱法测定食品中的防腐剂和甜味剂 High performance liquid chromatography 内容提要 高效液相色谱法(HPLC)的特点 高效液相色谱法的主要类型和原理 高效液相色谱仪 色谱柱简介 色谱理论基础 实验内容 (二)化学键合相色谱法 以化学键合相为固定相的色谱法,简称键合相色谱法。 化学键合相:采用化学反应的方法将官能团键合在载体表面所形成的固定相。 (三)反相键合相色谱法 固定相:非极性键合相 如十八烷基硅烷(C18,ODS)、辛烷基(C8)键合硅胶 流动相:水为基础溶剂,加入一定量与水混溶的极性调整剂 常用甲醇-水、乙腈-水体系等 保留行为的主要影响因素 1、溶质的分子结构(极性) 极性越弱,疏水性越强,k越大,tR也越大。 同系物碳数越多,极性越弱,k越大; 引入极性取代基,降低疏水性,k值变小。 2、固定相 键合烷基的疏水性随碳链的延长而增加,溶质的k也增大。 硅胶表面键合烷基的浓度越大,则溶质的k越大。 3、流动相 极性越强,洗脱能力越弱,使溶质的k越大 溶剂种类:水为弱溶剂,醇为强溶剂 溶剂比例:水的比例增加,使k增大 中性盐的加入:使中性溶质的k增大 pH:影响弱酸、弱减的离解 流动相的pH降低,弱酸k增大,tR增大;弱碱相反。 Agilent HPLC1100五个主要部分: 高压输液
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