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单克隆抗体制备实验; 目录 ;一、实验目的;二、实验原理;三、实验材料;四、实验步骤(1);3. 收集Sp2/0细胞??
取已长满的Sp2/0细胞2~3瓶,用弯头尖吸管将细胞吹下来,置于50ml离心管中,原瓶补液继续培养
↓
4. 清洗脾细胞和Sp2/0 细胞 800rpm,离心5min
↓
弃上清,轻轻磕几下50ml离心管底部(使细胞团块松散),加入两吸管无血清1640,轻轻吹打均匀,补培养液至20ml
↓
脾细胞和Sp2/0 细胞,800rpm,离心5min
↓
5. 融合 ? ?? ??
?将PEG1500置于37℃水浴锅上,熔化后,加入0.5ml无血清1640,混匀,即为50%PEG
↓
取离心好的脾细胞和Sp2/0细胞,弃上清(注意保持这个姿势)用滤纸条轻轻沾去管壁上的培养液(保证PEG不被稀释)。将离心管放到37℃水浴中(用一小烧杯制备水浴),1min加入PEG(边加边搅),搅30sec;静止1min。
;四、实验步骤(3);五 . 注意事项
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