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扬州市植物组织培养实验室建设指导方案
(试行)
一、建设目的
植物组织培养是20世纪30年代初期发展起来的一项生物技术。在快速繁育、种苗脱毒、远缘杂交、突变育种、基因工程和生物制品等方面都得到了应用。植物组织培养技术涉及到多项高中生命科学课程中的基础知识,例如:细胞全能性原理、细胞增殖、细胞分化、植物激素及生命的基本元素和物质等。在生物选修一《生物技术》教材中,组织培养已经作为一个专题实验,成为高中升学考试的一个考点。组织培养作为一项生物技术,它对学生的动手能力和科学素养都提出新的要求,使学生能够在知识层面、能力层面和情感层面上达到了全面的拓展。
二、建设要求
组织培养实验室面积一般为96-120平方米,学生实验依据无菌间超净工作台的多少分组进行,原则上6~8人一组。
组织培养实验基于对无菌条件的严格要求,由准备室、缓冲间、无菌室、培养室和炼苗室四部分组成。
1、准备室
功能:进行一切与实验有关的准备 工作。完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、器皿洗涤、培养基配制与分装、培养基和培养器皿的灭菌、培养材料的预处理等。
设备:准备室应具备实验边台、药品柜、水池、仪器、药品、天平、纯水机(制作组织培养基用水)、酸度计、烘干箱、高压灭菌锅、超声波清洗器及常用的培养基配制用玻璃仪器等。
2、缓冲间
功能:是进入无菌室前的一个缓冲场地,减少人体从外界带入的尘埃等污染物。
要求:缓冲间需5~8平方米,保持清洁无菌。缓冲间需安装紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。
3、无菌间
功能:也叫接种室,主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的 技术程序,是植物离体培养研究或生产中最关键的一步。
要求:封闭性好,干爽安静,清洁明亮,能较长时间保持无菌,因此不易设在容易受潮的地方;地面、天花板及四壁尽可能密闭光滑,易于清洁和消毒;接种室要求在适当位置安装紫外线灭菌灯,同时加装中效净化过滤装置,使实验室达到无菌净化功能,地面做环氧地留坪,铺设耐磨、防紫外腐蚀的实验室专业地胶板。
设备:紫外灯、消毒器、酒精灯、接种器械(接种镊子、剪刀、解剖刀、接种针),超净工作台、药品等。
4、培养室和炼苗室
功能:对接种到培养瓶等器皿中的植物离体材料进行控制条件下的培养,要求能够控制光照和温度,并保持相对的无菌环境。
培养材料放在培养架上培养。进行精细培养类型,应采用光照培养箱进行培养。
培养室最重要的因子是温度,一般保持在20—27℃
炼苗室配备阶梯式炼苗架,和边台用于放置炼苗室的测量仪器和炼苗室耗材,同时配备水槽一组,便于炼苗室苗木的施水。
设备:光照培养架、摇床、培养箱、紫外灯、光照培养箱、空调等。
平面布局图(参考)
实验室配置方案:
编号
仪器名称
要求指标及特点
单位
数量
基础配置
1
超净工作台
垂直单向流,准闭合式台面。遥控控制风速、照明、杀菌灯。带HST紫外灯防护装置。洁净等级100级@0.5μm;菌落数≤0.5个/皿? 时(φ90mm培养平皿);紫外灯20W一个;预留杀菌接种设备接入开关;单人单面
台
8
2
电子分析天平
称量范围:0-200g 精确度
台
1
3
电子天平
量程0~300g,灵敏度0.01g
台
4
4
全自动数显立式高压蒸汽灭菌器
50L,全自动控制,不锈钢材料;微电脑全自动控制,数显,可控温度(50℃~120℃
台
1
5
智能光照培养架
HST-CS-4.3型,培养架尺寸(高×宽×深)180cm×45 cm×130cm,实用四层,每层实用面积125cm×45cm?,每层配三根36W高效节能灯管,三基色自然光,独立开关,拆卸方便;带有独立控时装置,可编程控时。
台
8
6
智能光照培养箱
容积:250L,液晶面板显示,外型尺寸(宽×深×高)544×544×1690,控温范围(精度°C)0-50±0.5,光照度12000(LX)单门、三层中空玻璃,内胆不锈钢,可配植物光,带锁。可定做30段温、湿、时设置。光照度12000LX(含)以上分五级可调
台
1
7
精密智能PH计
自动、手动温度补偿智能切换,pH值测量、电极电位测量、温度测量,输出记录信号:(1~2V、0~10mA),测量范围(pH):0.000~14.000,准确度:0.003,测量范围(mV):0~±1999.9,准确度:0.05%,
温度(℃):-5~110 ±0.5
台
1
8
实验室纯水器
进水:城市自来水,水温5—40℃? 水压1—5㎏?? TDS﹤200ppm ;一机两用,可同时制备取用两种水质的水,即RO水和超纯水,出水水质 RO水电导率≤5μS/cm@25℃;?电阻率≥0.2ΜΩ·cm@25℃,水质标准优于中国国家实验室用水(GB6682-92)三级水标准;优于一般蒸馏水 ;超纯水电导率≤0.
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