中药材知母中皂苷类成分的分析报告.pptVIP

中药材知母中有效成分分析概述 中药化学 袁航 药材概述 理化性质 化学成分结构 含量测定 检识鉴别 体内代谢 知母·概述 【植物来源】：百合科植物知母Anemarrhena asphodeloides Bge.的干燥根茎 【本草考证】：首载于《诗经·尔雅》 《神农本草经》将其列为中品 “味苦寒，主消渴，热中，降邪气，肢体浮肿，下水，补不足，益气……” 【功效】：清热泻火、滋阴润燥 【临床应用】：烦热消渴、热性病高烧、肺热咳嗽、结核病发热、糖尿病、大便干燥 皂 苷 【数量】：知母中现已有文献报道的甾体皂苷成分约有40种 【含量】：在根茎中含量约为6% 【分类】：据皂苷元的母核不同可分为螺甾烷类皂苷和呋甾烷类皂苷两大类。 螺甾烷类：以菝葜皂苷元连接不同的糖链构成的知母皂苷A，如皂苷A-Ⅰ,A-Ⅲ等；马尔可皂苷元、新吉托皂苷元、薯蓣皂苷元等及其与糖组成的皂苷 呋甾烷类：知母皂苷B，如知母皂苷B-Ⅰ、知母皂苷B-Ⅱ、知母皂苷B-Ⅲ等，知母皂苷E1、E2、N、O，知母皂苷H1、H2、I1、I2 【结构差异】：3-位羟基连接的糖链 19-位的取代基（-OH或-OCH3） 双键的位置（Δ5,6, Δ18,19） 22-位取代基有无 【药理作用】：防治老年痴呆症、保护脑缺血损伤、抗凝血、抗氧化、抗肿瘤、抗骨质疏松、抗炎、降血压、降血糖及降血脂等药理活性。 黄 酮 甾体皂苷： 1、苷元结晶性好，易溶于甲醇、乙醇、氯仿、乙醚等有机溶剂 2、皂苷多为无定性粉末，易溶于热水，稀醇 3、均具有旋光性，多为左旋 4、具有溶血性 5、皂苷的乙醇溶液可与甾醇形成难溶的分子复合沉淀物 6、颜色反应：L-B,R-H反应可与三萜皂苷进行区分 双苯吡酮类： 水溶性较差 结构修饰： 将芒果苷3-位酚羟基转化成3-ONa 在4-位引入磺酸钠基，制备得芒果苷磺酸钠盐 理化性质 2010版药典中中药知母TLC鉴别 指标成分 芒果苷 知母皂苷B-Ⅱ 前处理 稀乙醇，超声20min 30%丙酮，超声20min 薄层板类型 聚酰胺薄膜板 硅胶G薄层板 展开剂 乙醇-水（1:1） 正丁醇-冰醋酸-水 （4:1:5） 显色 365nm紫外光 香草醛硫酸试液，105℃加热至斑点清晰 薄层色谱法 香草醛（3-甲氧基-4-羟基苯甲醛）-浓硫酸显色剂 是薄层色谱广泛使用的一种通用显色剂 应用：在挥发油、萜类、甾类和皂苷等中药成分的薄层分离中，多能显示出颜色各异的斑点 未改进配制：含有1%香草醛的浓硫酸溶液 缺点：粘度高 喷显困难，往往使显色点呈“花斑状”，模糊不清 易将薄层表面喷散，对薄层扫描定量影响很大 改进方法：将浓硫酸中加入一定量的水以降低其粘度 结果：70%或60%的硫酸配置的显色剂，对样品显色的灵敏度、显色速度和呈色稳定性与浓硫酸配制基本相同。 现配制方法： 1g的香草醛加到60%的硫酸100ml中（1%） 15g香草醛+250ml乙醇+2.5ml浓硫酸（5%） 5g香草醛，用10%硫酸乙醇100ml（无水乙醇） （5%） 显色剂变革 知母皂苷入血成分研究 样品前处理：30ul血浆样本，文献用量 提取：乙腈蛋白质沉淀法 流动相选择：乙腈 ∶ 1 mmol·L-1乙酸铵溶液( 30:70，V :V) 色谱柱： Agilent Zorbax SB-C18 柱( 4. 6 mm × 150 mm，5 μm) 峰型好，分离度佳 分析时间长 AlltimaHP C18 柱( 2. 1 mm × 50 mm，5 μm) 良好峰型 缩短分析时间：t（知母皂苷 B-Ⅱ）=1.78min t(重楼皂苷，内标)=1.96min 分析周期3min 血液中知母皂苷B-Ⅱ测定 含量测定 指标成分： 2005版之前药典：菝葜皂苷元 2010版药典：芒果苷和知母皂苷B-Ⅱ HPLC-ELSD HPLC-MS 薄层色谱扫描法 酶联免疫法 显色剂-UV HPLC-ELSD 皂苷类成分大多数无紫外吸收，所以对其皂苷类成分的含量测定，目前报道常用ELSD显示器和示差折光法测定。 蒸