透射电镜实验报告.docVIP

电子显微镜生物标本的制备及观察 【实验目的】 　　了解电子显微镜的基本原理及电镜生物标本的制备方法和观察。 【实验原理】 　　电子显微镜是细胞生物学研究的重要工具，它以电子束为照明源，利用电子流具有波动的性质，在电磁场的作用下，电子改变前进轨迹，产生偏转、聚焦，因而电子束透过标本后在电磁透镜的作用下可放大成像。高速运动的电子流其波长远比光波波长短，所以电镜分辨率远比光镜高，可达0.14nm，放大倍率可达80万倍。由热阴极发射的电子在20～100千伏加速电压作用下，经聚焦后投射到很薄的标本上，并与标本中各种原子的核外电子发生碰撞，造成电子散射，在细胞质量和密度较大的部位，电子散射度强，成像较暗。在质量、密度较小处电子散射弱，成像较亮，结果在荧光屏上形成与细胞结构相应的黑白图像。 【仪器、材料与试剂】 器材和仪器 Hitachi透射电子显微镜、超薄切片机、恒温箱、400目铜网等。 材料和标本 组织标本均由老师提供。 试剂 2.5％戊二醛(0.1mol／L(pH7.4)二甲砷酸钠缓冲液配制)、1％锇酸、30％、50％、70％乙醇溶液、80％、90％、95％、100％丙酮溶液、环氧树脂包埋剂、柠檬酸铅染液、双蒸水。 【实验内容】 透射电镜生物标本超薄切片的制备（已由老师完成） 1．取材 用锋利的刀片切取1mm3目标样本组织，立即投入固定液中，取材要