基因工程-1-工具酶.ppt

三、用途 一、单链核酸酶（S1/ Bal31 Nuclease) 带切口的双链DNA DNA修饰酶 2.Bal31单链核酸酶的用途 2.1 DNA的缺失突变(Bal31) Bal31单链核酸酶具有单链核酸内切酶和双链DNA的3’、5’末端同时降解的活性。 5P P5 3HO OH3 末端转移酶 1.来源： 又称脱氧核苷酸转移酶，自牛胸腺中分离。  2.活性： 催化dNTP掺入DNA 3′-OH末端，形成同聚物末端；反应不需模板DNA，需Co2+。 ①ssDNA 3’-OH加尾 ②dsDNA 3’-OH加尾(包括平末端加尾) 5’ AACC-OH 5’ AACCTTTT 转移酶 Mg ++、dTTP 5’ AACC-OH 3’ TTGG 5’ AACCTTTT 3’ TTGG 转移酶 Co 、dTTP 3.用途: ①载体和DNA加上同聚“尾巴”以形成粘性末端 ②DNA 3’-OH端同位素标记 三、碱性磷酸酶与磷酸激酶 T4 DNA连接酶 碱性磷酸酶 内切酶 外源基因 磷酸激酶加磷酸基 P OH OH OH OH OH OH OH OH P P P Vector OH OH OH OH 牛小肠碱性磷酸酶（CIAP） Alkaline Phosphatase, Calf Intestinal T4多聚核苷酸激酶 T4