大黄中游离蒽醌的取与分离和鉴定.doc

实验一 大黄中游离蒽醌的提取与分离和鉴定 实验编号:1 日期: 学时数: 6学时 地点: 任课教师: 实验目的:掌握从大黄中提取和分离游离蒽醌的方法 实验原理:大黄中有多种游离蒽醌及其苷类,总含量约2-5%。主要有大黄酸、大黄素、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素甲醚以及它们的葡萄糖苷等。从大黄中提取分离游离蒽醌时,先用20%硫酸加热使苷类水解，保留滤饼，滤饼用乙醚加热回流提取总蒽醌苷元（游离蒽醌），提取液作TLC鉴识。 实验对象:大黄 主要仪器、试剂:电热套、烧杯、20%硫酸、薄层硅胶G 、0.5%CMC-Na。 实验操作步骤: 酸水解：取大黄10g ,粉碎，加20%硫酸水溶液100ml，水浴上加热3-4小时,抽滤,滤饼水洗后自然干燥。 铺薄层硅胶G板: 薄层硅胶G :0.5%CMC-Na(1:3) 实验注意事项: = 1 \* GB3 ①加热温度不要太高。 = 2 \* GB3 ②溶液保持微沸，防止药渣炭化。 = 3 \* GB3 ③不断搅拌。 后记: 实验一 大黄中游离蒽醌的提取与分离和鉴定 实验编号:2 日期: 学时数: 6学时 地点: 任课教师: 实验目的:1.掌握从大黄中提取和分离游离蒽醌的方法。 2.掌握蒽醌类的色谱鉴别方法。 实验原理:大黄中有多种游离蒽醌及其苷类,总含量约2-5%。主要有大黄酸、大黄素、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素甲醚以及它们的葡萄糖苷等。从大黄中提取分离游离蒽醌时,先用20%硫酸加热使苷类水解，保留滤饼，滤饼用乙醚加热回流提取总蒽醌苷元（游离蒽醌），提取液作TLC鉴识。 实验对象:大黄滤饼 主要仪器、试剂:电热套、圆底烧瓶、冷凝管、乙醚、硅胶薄层板、石油醚、乙酸乙酯 实验操作步骤: 总羟基蒽醌苷元的提取：取干燥滤饼，放入100ml圆底烧瓶中，加入乙醚50ml,回流提取3－4小时，得乙醚提取液。 乙醚提取液经薄层层析检查有大黄酸、芦荟大黄素、大黄素、大黄素甲醚和大黄酚。薄层板为硅胶G-CMC-Na,展开剂为石油醚（60-90℃）－乙酸乙酯（７：３），直立展开。 实验注意事项: = 1 \* GB3 ①加热回流时电热套电压小于50v。 = 2 \* GB3 ②取石油醚（60-90℃）7ml,乙酸乙酯3ml,混合均匀。。 = 3 \* GB3 ③控制点样量，注意点样斑点位置。 = 4 \* GB3 ④仔细观察斑点、溶剂前沿移动距离。 后记:结论：在可见光下可看到4个斑点，Rf最大的黄色斑点为大黄酚和大黄素甲醚的混合物，其余3个斑点依Rf由大到小分别为大黄素（橙色斑点），芦荟大黄素（黄色斑点），大黄酸（黄色斑点 【实训目的】1、能够运用回流提取法对大黄中总蒽醌类化合物进行提取2、能够熟练运用pH梯度萃取法对大黄中游离蒽醌进行分离.3、正确判断显色反应、薄层色谱的结果【实训原理】??? 大黄中含有大黄素型游离蒽醌及其苷类,本实训利用大黄中的蒽醌类化合物均可溶于乙醇而提取,根据游离蒽醌及蒽醌苷在水和乙醚中溶解度的不同采用萃取方法分离.游离蒽醌的分离是利用各羟基蒽醌类化合物酸性不同,采用pH梯度萃取法进行.【实训材料】??? 圆底烧瓶、冷凝管、研钵、水浴锅、分液漏斗、烧杯、三角瓶、表面皿、试管、层析缸、pH试纸薄层硅胶、CMC-Na、大黄粗粉、95%乙醇、乙醚、盐酸、三氯甲烷、5%KOH、5%Na2CO3、5%NaHCO3、0.5%NaOH、新华色谱滤纸(20cm×7cm)、苯-醋酸乙酯(8∶2)、苯-甲醇(8∶1)、甲苯、氨0.5%醋酸镁、1%大黄酸三氯甲烷溶液、1%大黄素三氯甲烷溶液、1%芦荟大黄素三氯甲烷溶液【实训步骤】1、乙醇总提取物的制备??? 游离蒽醌的提取 取大黄粗粉50g,置于500ml圆底烧瓶中,加95%乙醇以约高出生药面为度,置水浴加热回流2～3小时,趁热抽滤.滤渣再以95%乙醇热提二次,趁热抽滤后合并三次乙醇提取液.浓缩乙醇提取液,得到乙醇总提取物.2、总游离蒽醌的提取,亲脂性成分与亲水性成分分离??? 将乙醇总提取物浸膏加水适量混悬,加乙醚150ml于500ml分液漏斗中萃取,充分振荡后放置,倾出醚层,再加50ml乙醚振摇,放置,倾出醚层,同法操作6次,直至乙醚液呈色较浅时为止,合并乙醚液,乙醚溶液含总游离蒽醌.3、蒽醌单体的分离? ①大黄酸的分离??? 将含有游离蒽醌的乙醚溶液移至250ml的分液漏斗中,加5%NaHCO3水溶液20ml,振摇.放置分层,放出下层NaHCO3溶液,置于另一三角瓶中,上层乙醚溶液留存于分液漏斗中,再加5%NaHCO3溶液15ml萃取一次,每次振摇提取后,放置分层时间应稍久,以免乙醚溶液混在下层水液中,影响分离效果.提取过程中,如乙醚挥发,可酌