MCI资料大全-填料特性-使用方法及装柱等注意事项.pdf

MCI 资料大全-MCI 柱以及MCI 填料 MCI GEL 是指中压色谱分离凝胶， 是Middle Chromatogram Isolated Gel 的缩写，一般是指聚合物基材的小粒径色谱填料(Chromatogram Polymer)，通 称为MCI GEL CHP 填料，广泛的应用于天然产物和发酵产物、有机小分子的 分离。 常用的MCI GEL CHP 有聚苯乙烯/二乙烯基苯型(PS/DVB)和丙烯酸酯型两 种聚合物类型的填料。化学结构支配着合成吸附剂的疏水性，吸附剂的疏水性 是根据目标物化学性质来选择吸附剂类型的重要依据。一般而言，聚苯乙烯型 聚合物填料适合于分离中等疏水性的化合物，由于具有苯环结构，所以与其他 类型的反相填料相比，具有不同的分离选择性。聚甲基丙烯酸脂亲水性强，适 合分离具有一定极性的物质。 这类聚合物基材填料的优点是在pH1-14 的范围均可使用。相对于硅胶基质 的C18 填料，这类填料具有更强的疏水性，与硅胶基材反相填料具有不同的分 离选择性。聚合物基材的填料可以在极端的酸碱溶液（如1N NaoH、Hcl ）和有 机溶剂（包括甲醇，乙醇，丙酮，异丙醇，乙腈，四氢呋喃等）中都可保持球 体结构和性能的稳定，有利于开发工艺和优化分离条件，从而达到高分辨率和 高产品回收率。由于其化学稳定性，非常适用于FDA 规定下CIP/SIP 要求的清 洗方案。 聚合物基材填料可以制成不同的粒径供客户选择。当您分离纯化前考察填料 对样品的选择性时，可以选择小粒径的填料制成的高压柱。50um 左右粒径的填 料可以在常压下使用，借助于中低压层析系统，分离效果更佳。同时， 中压色 谱分离凝胶相比高压色谱填料价格更便宜，对设备要求相对较低，更适合较大 规模的工业纯化使用。 由于中压色谱分离凝胶具有诸多优点，所以在天然产物和发酵产物、有机小 分子的分离等领域具有广泛的应用。与此同时，专业的色谱器材供应商（如HE ） 还开发了与此相配套使用的专用层析柱和层析系统，极大地提高了广大科研， 生产用户的分离效率。 分离原理： MCI GEL CHP20p 应该是吸附为主，其实同C18 一样，只不过结构不同，但 两者无法在同一个条件下进行比较。MCI 是凝胶的一种，主要是反相和分子筛的 原理。 MCI 的预处理： 将MCI 加入到烧杯中，加入适量甲醇，搅拌，使其浸泡30min，将甲醇倒出， 加入蒸馏水充分搅拌，浸泡30min，准备装柱。 装柱： 搅拌使MCI 混旋均匀，搅拌均匀后，缓缓将其倒入准备好的玻璃柱内，活塞 打开，倒入速度稍微快一些，在倒入的过程中，要不断的在烧杯里轻轻搅动，以 防止MCI 沉降于底部，尽量不要中断，一次性倒入，可以很好地防止断层。当 柱子装好后，用蒸馏水冲洗MCI 柱。 上样： 用MCI 柱分离物质时一般使用梯度乙醇或甲醇洗脱，因此上样时应样品应 用水或低浓度的相应的醇溶解，然后将样品均匀的加到色谱柱上。 洗脱： 洗脱时采用梯度醇浓度由低到高洗脱，分别收集洗脱液， 再生： 洗脱完成后，用无水乙醇或甲醇冲洗MCI 柱，若填料污染严重，用丙酮冲 洗柱子，若还不行可考虑用一定浓度的酸或碱冲洗柱子，冲洗液的PH 值应控制 在1-13 内，一般采用0.1mol/L 的NaOH 溶液冲洗。用酸或碱冲洗好后将柱子用 蒸馏水洗至中性，然后再用甲醇洗脱两个柱体积，用甲醇保存柱子。 相关说明： MCI 系列精细分离填料是在三菱化学Diaion 和Sepabeads 大孔吸附树脂 基础上设计的，因为基于现代的HPLC 高压液相色谱分离技术，较小的颗粒有 更高的色谱分离性能，广泛地用于分离天然产物和发酵产物的分离。其特点如下： 1、卓越的性能，球型颗粒，颗粒尺寸分布很窄； 2、用三菱化学的优良技术和严格的质量控制，提供高水平高质量MCI GEL 系 列填料； 3、粒度范围广，从4μm 到300μm，可应用于装填分析和制备柱； 4 、品种非常齐全，其中MCI GEL CHP 20P （75~150μm ）是最为广泛使用的 型号。 MCI GEL 适用于从分析制备到工业规模纯化 填料类型 产品型号 粒径分布 平均粒径比表面积 细孔容积最频度 半径 2 MCI GEL CHP10M 4μm 4μm 640m /g