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T6新世纪紫外可见分光光度计操作规程
开机自检:打开仪器主机电源,仪器开始初始化;约3分钟时间初始化完成。
初始化完成后,仪器进入主菜单界面。
二、进入光度测量状态:按键,进入光度测量界面。
三、进入测量界面:按键进入样品测定界面。
四、设置测量波长:按键,输入测量的波长,按键确认,仪器将自动调整波长。
五、进入设置参数:按键进入参数设定界面,按键使光标移动到“试样设定”,按键确认,进入设定界面。
六、设定使用样品池个数:按键使光标移动到“使用样池数”,按键循环选择需要使用的样品池个数。
七、样品测量:按键返回到参数设定界面,再按键返回到光度测量界面。在1号样品池内放入空白溶液,2号池内放入待测样品。关闭好样品池盖后按键进行空白校正,再按键进行样品测量。
如果需要测量下一个样品,取出比色皿,更换为下一个测量的样品按键既可读数。
如果需要更换波长,可以直接按键,调整波长。
如果每次使用的比色皿数量是固定个数,下一次使用仪器时可以跳过第五、六步骤直接进入样品测量。
注意:更换波长后必须重新按进行空白校正。
八、结束测量:
测量完成后记录数据, 退出程序或关闭仪器后测量数据将消失。确保已从样品池中取出所有比色皿,清洗干净以便下一次使用。按键直到返回到仪器主菜单界面后再关闭仪器电源.
【引入】
水杨酸(2-羟基苯甲酸;2-Hydroxybenzoic acid):存在于自然界的柳树皮、白珠树叶及甜桦树中,为白色结晶性粉末,无臭,味先微苦后转辛。熔点157-159℃。水杨酸水溶液的pH值为2.4。水杨酸与三氯化铁水溶液生成特殊的紫色。
紫外分光光度法测定水杨酸的含量
1.仪器
1.1紫外分光光度计(T6)
1.2石英比色皿(1cm):2个
1.3容量瓶(100mL):7只
1.4吸量管(1 mL、2 mL、5 mL、10mL):各1只
2.试剂
2.1水杨酸标准溶液(1mg/mL);
2.2未知液:浓度约为50~55。
3.实验操作
3.1吸收池配套性检查
石英吸收池在220nm装蒸馏水,以一个吸收池为参比,调节为100%,测定另一吸收池的透射比,其偏差应小于0.5%,可配成一套使用,记录第二比色皿的吸光度值作为校正值。
3.2吸收曲线的绘制
准确吸取未知液5mL,于100 mL容量瓶中配成浓度约为10的待测溶液,以蒸馏水为参比,于波长200~350nm范围内测定吸光度,作吸收曲线,从曲线上查得最大吸收波长(230nm和297nm附近)。
3.3标准曲线的绘制
准确吸取水杨酸标准溶液若干体积,稀释成一系列不同浓度的标准溶液(0~16),于最大吸收波长分别测出其吸光度。然后以浓度为横坐标,以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。
3.4样品测定
由步骤3.2的测定结果,从标准曲线查出样品的浓度。
4.结果计算
根据未知液的稀释倍数,可求出未知液的浓度。
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