第十章-动物细胞培养技术的应用.pptVIP

动物细胞培养技术的应用 细胞培养技术可从细胞水平上帮助人类揭开生、老、病、死的规律，探索优生、抗衰老、防治疾病的手段或途径，人为地诱导细胞遗传性状的改变，使其向更有利于人类和自然界的方向发展。尤其随着细胞生物学和分子生物学的相互渗透，分子克隆技术与细胞培养技术相结合，在阐明基因的结构与功能，基因在细胞生长和分化中的作用，以及细胞癌变机制等方面起了重要作用。因此，对活细胞的研究仍是当前生命科学的中心问题之一。 单克隆抗体的制备-举例 B淋巴细胞与抗体 单克隆抗体 如何大量生产单克隆抗体？ 利用淋巴细胞产生抗体的功能 利用肿瘤细胞无限增殖的特性 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞 细胞融合与融合诱导细胞融合物质 * * * * 动物细胞培养技术的应用* 1、提供细胞产品（如干扰素、单克隆抗体等 生物制品） 2、提供工程细胞（如基因工程的受体细胞） 3、检测物质毒性 4、医药等科学研究方面 –生理、药理等 什么是抗体？ 　抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 抗体由B淋巴细胞产生。 １．B淋巴细胞受抗原刺激后，可 以产生抗体。 ２．动物体内的B淋巴细胞可以产生百 万种以上的抗体，每种抗体对特定 的抗原具有特异性免疫作用。 ３．每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。 　　由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 　特点： 　　　 特异性强、灵敏度高 动物细胞融合 细胞融合是正常的生命活动 两个细胞正在融合 受精作用 细胞A 细胞B 杂种细胞 灭活的病毒 物理法 化学法 仙台病毒 疱疹病毒 新城鸡瘟病毒 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程 细胞核 病毒颗粒 细胞核 诱导剂：仙台病毒等 聚乙二醇 电融合 诱导细胞融合的仙台病毒必须灭活（失去感染性）。 单克隆抗体制备过程 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 小结 两个过程 动物细胞培养过程 单克隆抗体制备过程 三个“一” 一个诱导细胞融合的新方法 －－灭活病毒 一个新细胞－－杂交瘤细胞 一个优势－－单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势 思考： 1、本过程利用了哪些技术方法？ 免疫、细胞融合和动物细胞培养等技术方法 2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ 这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体 单克隆抗体的应用 与常规抗体相比，单克隆抗体产量高，特异性强，灵敏度高，优越性十分明显。 应用主要有： 1、临床诊断 2、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹” 治疗肿瘤