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生物技术通报
·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( )
2018, 34 6 :79-83
甘蔗宿根矮化病多克隆抗体和免疫磁珠的制备
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郭莺 汪文华 刘黎卿 胡敏
（1. 福建省亚热带植物研究所 福建省生理生化重点实验室，厦门 361006 ；2. 华侨大学化工学院，厦门 361021）
摘 要 ： 本研究通过制备Lxx（Leifsonia xyli subsp. xyli ）免疫磁珠，实现对甘蔗Lxx 进行分离，用于病原菌与甘蔗互作的深
入研究。以RSD PCR 检测呈阳性的感病甘蔗为材料，分离培养Lxx 抗原进行多克隆抗体制备，利用磁性Fe3O4 纳米粒子与Lxx 多
克隆抗体偶联制备免疫磁珠。根据菌落的形态特征，并结合PCR 验证确认所分离到的菌是甘蔗宿根矮化病的致病菌Lxx，免疫
兔子后获得了较好的多克隆抗体，间接ELISA 测定Lxx 多克隆抗体的效价高于204 800。免疫磁珠外观成球性较好，粒径大小在
125-268 nm 之间，对菌培养液中Lxx 亲和性强分离物可用于进一步的PCR 实验。Lxx 免疫磁珠的成功制备，能够快速实现Lxx 的
分离与富集，为Lxx 与甘蔗互作时期下甘蔗感病性检测和病原菌的富集提供了便捷高效的技术手段。
关键词 ： 甘蔗宿根矮化病 ；致病菌Lxx ；多克隆抗体；免疫磁珠
DOI ：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2017-1012
Preparation of Polyclonal Antibody Against Ratoon Stunting Disease
and Its Immunomagnetic Beads
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GUO Ying WANG Wen-hua LIU Li-qing HU Min
（1. Fujian Key Laboratory of Subtropical Plant Physiology and Biochemistry ，Fujian Institute of Subtropical Botany ，Xiamen 361006 ；2.
Institute of Chemical Technology ，Huaqiao University ，Xiamen 361021 ）
Abstract: This study is to isolate sugarcane Lxx by preparing Lxx immunomagnetic beads（IMB）for the further study the interaction
between pathogen and sugarcane. The pathogen of Lxx was isolated from the RSD PCR-verified infected sugarcane for the preparation of
polyclonal antibody. Then the Lxx polyclonal antibody was coupled with magnetic Fe3O4 nano particle for preparing IMB. The isolates were
identified as Lxx acco
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