高效液相色谱法检测酱油中的苯甲酸钠.docVIP

PAGE PAGE 7 高效液相色谱法检测酱油中的苯甲酸钠 1．原理 酱油样品经酸化后，用乙醚提取苯甲酸，定容过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间定性和峰面积定量。 2．试剂 甲醇:分析纯，经滤膜（HF 0.5?）过滤； 无水乙醚：分析纯； 无水乙醇：分析纯； 6N盐酸：取36~38%的盐酸500ml，定容至1000ml； 4%氯化钠溶液：称取40.0g氯化钠,定容至1000ml； 0.02M乙酸铵溶液：1.54g乙酸铵定容至1000ml,溶解后经滤膜(HA 0.45?)过滤； 苯甲酸标准储备液：称取苯甲酸0.1000g加2%碳酸氢钠溶液1ml,搅拌溶解,加水定容到100ml，苯甲酸浓度为1mg/ml； 苯甲酸标准使用液：取苯甲酸标准储备液10ml，放入100ml容量瓶中，定容至刻度，苯甲酸浓度为0.1mg/ml。 3．高效液相色谱条件 Spectra-Physics 高效液相色谱仪； 色谱柱：Spherisorb ODS1 Ф4.6mm?200mm； 检测器：紫外检测器，波长230nm，灵敏度0.2 AUFS； 流动相：甲醇:0.02M乙酸铵（5：95）； 流速：1ml/min； 进样量：10?l； 允许差：相对误差≤10%。 4．操作方法： 4.1样品预处理： 称取均匀的酱油样品5.0g放入125ml的分液漏斗中，加