实验八微生物的接种技术及分离纯化.pptVIP

实验八 微生物的分离纯化及平板计数;1．掌握倒平板的方法和几种分离纯化微生物的基本操作技术。2．学习平板菌落计数的基本原理和方法  ;实验原理;;吸取稀释液取一吸管，以无菌操作法分别吸取10－5、10－6、 10－7土壤稀释液0.1mL，加在已制好的平板培养基上。 涂板用玻璃刮刀将稀释液在培养基上充分混匀铺平，倒置于恒温箱培养。 计算出每克土壤中细菌的数量。即用某一培养皿内的菌落数乘以该培养皿接种液的稀释倍数即得。 挑取单个菌落，进行划线分离。;;微生物的分离—平板倾注法;微生物的分离—平板划线法;;;实验材料;实验步骤;;3．涂布 选择3个连续梯度（10-4、10-5、10-6），每个稀释度涂布2个平板，涂布时用无菌吸管每个平板滴加0.1mL，用无菌玻棒涂布均匀。 4．培养 37℃倒置培养过夜。 5．计数并检验产胞外淀粉酶的菌株 总菌落计数完后，将平板内滴加1-2ml卢戈氏碘液，菌落周围产生透明圈的菌落就是产胞外淀粉酶的菌株，观察并计数;二、划线分离 ;（1）计算相同稀释度的平均菌落数有较大片菌苔生长时，弃用；以无片菌苔生长的平皿计数。若片菌苔大小不到培养皿的一半，其余一半分布均匀，将此一半计数×2（2）选择平均菌落数在30～300之间的平板只有一个符合此范围时，以该平均菌落数乘稀释倍数。有两个在30～300间时，按两者菌落总数比值决定：比值小于