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- 2019-08-01 发布于安徽
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策略之四 使用PCR增强剂 甲酰胺,DMSO,甘油,甜菜碱等都可充当PCR的增强剂。 其可能的机理是降低熔解温度,从而有助于引物退火并辅助DNA聚合酶延伸通过二级结构区。 增强剂浓度要适当 谢谢! 本公司产品江苏地区特约代理 南京天为生物科技有限公司 联系电话:0258470530124小时服务热线联系人:王彤 免费技术支持:800 810 2177 谢 谢! 放映结束 感谢各位的批评指导! 让我们共同进步 * 基因组扩增(较高灵敏度和特异性) PCR常见问题、原因分析及其对策 主讲人:欧阳志荃 PCR技术简介 PCR常见问题、原因分析及其解决方案 提高PCR反应特异性的策略 主讲内容 PCR技术简介 PCR标准反应体系 DNA模板 引物 反应缓冲液 dNTP ddH2O 耐热聚合酶 反应体系对PCR扩增的影响 DNA模板 纯度 蛋白、多糖、酚类等杂质会抑制PCR反应 完整性 模板降解会导致PCR扩增无产物 浓度 加量过多导致非特异性扩增增加 特异性 长度适当、避免二级结构和二聚体 完整性 避免反复冻融 浓度 应适当,过高导致非特异性增加,过低则 引 物 扩增产物太少 反应体系对PCR扩增的影响 反应Buffer pH值,盐离子浓度 稳
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