不明原因不育症患者精子超微结构的分析.pdfVIP

万方数据 摘 要 摘 要 目的： 以不明原因不育症患者精液精子为研究材料，利用透射电镜观察其精子超微结构的 畸变，探讨其超微结构的畸变与男性不育之间的关系，比较常规电镜包埋的材料与仅用 戊二醛固定材料超微结构下头部空泡的的差异并分析其物质组成。 方法： 实验一：研究对象为结婚 2 年，女方生殖系统功能正常，原因不明不育症患者 8 例 和结婚 1 年孕育有孩子的正常生育男性 3 例。研究对象在禁欲 3-7 天后，于室温自行按 摩取精。待精液自动液化后，一部分缓慢注入离心管，以 650g 离心 10min，弃去上层 精浆，沉淀精子用琼脂糖进行预包埋，戊二醛固定 1h 后，PBS （pH=7.2 ）漂洗 3 次（10min /次），锇酸固定 1h，然后用 Epon812 环氧树脂包埋，超薄切片用醋酸铀-柠檬酸铅双重 染色，透射电子显微镜观察。主要观察精子的顶体、细胞核、线粒体和微管等超微结构 改变。 实验二：研究对象同实验一。利用透射电镜对 8 例不明原因不育症患者和 3 例正常 生育男性精液精子常规处理的电镜材料与仅用戊二醛固定和醋酸铀染色处理的电镜材 料进行对比研究，对精子头部空泡、细胞核、顶体等超微结构进行观察，分析精子头部 空泡的物质组成。 结果： 1、透射电镜观察，正常精子的质膜和顶体膜结构完整清晰，精子核呈梨状，核染 色质电子密度均匀一致，精子头部无或有少量空泡，尾部线粒体大小形态一致，排列规 律，精子尾部微管 9+2 结构完好。 2 、不育患者精子头部形态异常、头部空泡多发，顶体超微结构产生畸变、尾部线 粒体数减少或分布不均、轴丝 9+2 结构紊乱等。 3、超微结构研究表明，不明原因不育患者精子畸形高于正常生育男性，精子头部 空泡多发，空泡中含有脂类、蛋白质类及核酸类物质。 I 万方数据 摘 要 结论： 不明原因不育症患者精子存在顶体、精子核、线粒体、微管等超微结构改变，精子 头部空泡增多等。其超微结构异常及过多的精子头部空泡可能是其不育原因之一，建议 不明原因不育患者增加常规透射电镜精子检查项目，条件允许情况下可选择头部无或/ 少 或/ 小空泡精子进行胞浆内形态学筛选精子注射（Intracytoplasmic Morphologically Selected Sperm Injection,IMSI ）辅助生殖技术。精子空泡中存在脂类、蛋白质类及核酸 类物质，其来源有待进一步研究。 关键词 不明原因不育症 精子 头部空泡 超微结构 II 万方数据 Abstract Abstract Semen samples from unexplained infertility patients were selected as research materials, using transmission electron microscope to observe the distortion of the sperm ultrastructure,to explore the relationship between the abnormal ultrastructure and male infertility. Compare the ultrastructural differences between the head vacuoles in the sperm embeded with normal TEM