提RNA+逆转录+qRT-PCR步骤.docVIP

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2019-08-11 发布于四川
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提RNA+逆转录+qRT-PCR步骤.doc

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【一、提RNA】一、实验准备： 1、试剂：75%乙醇、Trizol、1.5mL 进口EP管、氯仿、异丙醇、进口枪头(RNA专用)、 2、配75%乙醇(DEPC水+无水乙醇)，放-20℃冰箱预冷； 3、预冷离心机(1.5mL EP管用的)； 4、清洁桌面，酒精喷过之后擦干，新手套、两层口罩；二、操作步骤： 01、弃上清（不回收，直接倒去）； 02、1mL/孔 PBS洗两遍（不回收，直接倒去，随后用200μL枪吸尽PBS）； 03、每孔加500μL Trizol，轻晃，随后室温放置2min左右； 04、枪头吹打，吸出放入1.5mL 进口EP管； 05、加入100μL氯仿(即1/5体积的triz