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答案:(1)预期蛋白质的功能 蛋白质的三维结构 应有的氨基酸序列 相应的脱氧核苷酸序列(基因) (2)自然界已存在 人类生产和生活的 基因修饰 基因合成 改造 (3)空间(或高级) (4)应该通过对基因的操作来实现对天然蛋白质的改造 首先,任何一种天然蛋白质都是由基因编码的,改造了基因也就是对蛋白质进行了改造,而且改造过的蛋白质可以通过改造过的基因遗传下去;如果对蛋白质直接改造,即使改造成功,被改造过的蛋白质分子也无法遗传。其次,对基因进行改造比直接对蛋白质进行改造要容易操作,难度要小得多 2.已知生物体内有一种蛋白质(P),该蛋白质是一种转运蛋白,由305个氨基酸组成。如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸,240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸,改变后的蛋白质(P1)不但保留P的功能,而且具有了酶的催化活性。回答下列问题: (1)从上述资料可知,若要改变蛋白质的功能,可以考虑对蛋白质的________进行改造。 (2)以P基因序列为基础,获得P1基因的途径有修饰________基因或合成________基因。所获得的基因表达时是遵循中心法则的,中心法则的全部内容包括________的复制,以及遗传信息在不同分子之间的流动,即:________。 (3)蛋白质工程也被称为第二代基因工程,其基本途径是从预期蛋白质功能出发,通过________和________,进而确定相对应的脱氧核苷酸序列,据此获得基因,再经表达、纯化获得蛋白质,之后还需要对蛋白质的生物________进行鉴定。 解析:(1)从题中所述资料可知,将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸,240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸后,该蛋白质的功能发生了改变,此过程是通过对构成蛋白质的氨基酸的排列顺序进行改造,进而改变了蛋白质的结构,从而改变了蛋白质的功能。(2)在蛋白质工程中,目的基因可以以P基因序列为基础,对生物体内原有P基因进行修饰,也可以通过人工合成法合成新的P1基因。 中心法则的内容如下图所示: 由图可知,中心法则的全部内容包括:DNA以自身为模板进行的复制,DNA通过转录将遗传信息传递给RNA,最后RNA通过翻译将遗传信息表达成蛋白质;在某些病毒中RNA可自我复制(如烟草花叶病毒等),在某些病毒中能以RNA为模板逆转录合成DNA(如HIV),这是对中心法则的补充。(3)蛋白质工程的基本途径是预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→合成DNA→表达出蛋白质,经过该过程得到的蛋白质,需要对其生物功能进行鉴定,以保证其发挥正常作用。 答案:(1)氨基酸序列(或结构) (2)P P1 DNA和RNA(或遗传物质) DNA→RNA、RNA→DNA、RNA→蛋白质(或转录、逆转录、翻译) (3)设计蛋白质的结构 推测氨基酸序列 功能 [课堂归纳] [易错清零] 易错点1 混淆启动子与起始密码子,终止子与终止密码子,不明确标记基因的作用 [提示] 启动子≠起始密码子,终止子≠终止密码子 (1)启动子:一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端。它是RNA聚合酶识别、结合的部位。 (2)终止子:一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的尾端。作用是使转录过程停止。 (3)起始密码子和终止密码子位于mRNA上,分别控制翻译过程的启动和终止。 (4)标记基因:一般为抗生素抗性基因或荧光基因等,其作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因(目的基因是否导入成功),从而将含目的基因的细胞筛选出来。 易错点2 误认为切取目的基因与切取载体时“只能”使用“同一种酶” [提示] (1)在获取目的基因和切割载体时通常用同种限制酶,以获得相同的黏性末端。但如果用两种不同限制酶切割后形成的黏性末端相同时,在DNA连接酶的作用下目的基因与载体也可以连接起来。 (2)为了防止载体或目的基因的黏性末端自己连接即所谓“环化”,可用不同的限制酶分别处理目的基因和载体,使目的基因两侧及载体上具有两个不同的黏性末端。 2.基因表达载体的构建——基因工程的核心 (1)目的:使目的基因______________________,同时使目的基因能够表达和发挥作用。 答案: 2.(1)在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代 (2)基因表达载体的组成 答案:(2)RNA聚合酶 转录 转录 目的基因 (3)构建过程 答案:(3)同种限制酶 DNA连接 3.将目的基因导入受体细胞 (1)受体细胞种类不同,导入方法不同 生物种类 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 ____________ ____________ ____________ 受体细胞 体细胞 ________ 原核细胞 答案: 3.(1)农杆菌转化法 显微注射法 感受态细胞法 受精卵 转化过程 将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上→导入农杆
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