急性毒性试验A.ppt

皮肤黏膜用药即局部用药，包括皮肤用药、直肠或阴道给药、滴眼药、滴鼻药、滴耳剂、吸入剂及口腔咽喉用药等。主要考察它们的局部毒性作用和局部用药后引起的全身毒性作用。如果是局部用药治疗全身疾患的，还应参照全身用药的规定做长期毒性试验。三、四类外用药治疗局部疾患且方中不含毒性药材或有毒成分的，—般可不做长期毒性试验，但需做局部刺激试验、过敏试验，必要时需做光敏试验。有关皮肤黏膜用药的毒性试验分述如下。 第—节 皮肤黏膜用药急性毒性试验 皮肤黏膜用药急性毒性试验目的是，观察动物皮肤(完整皮肤和破损皮肤)或黏膜短时期(一般为单次，或中药制剂毒性较低，24h内数次)接触受试物，因吸收作用而使机体产生毒性反应。 一、动物 常用动物为成年健康的白色家兔、白色豚鼠、白色大鼠或白色小型猪，雌雄各半。婴儿用药用年轻的动物，如白色家兔(1．5kg左右)、白色豚鼠(o. 2kg左右)。 二、试验方法 (一)皮肤准备 动物给药前24h背部脊柱两侧去毛(剪、剃，或适宜脱毛剂)，去毛面积约为体表面积的10％(家兔约150cm2，豚鼠约40cm2，小型猪约300cm2)。去毛后24h检杳去毛皮肤是否因去毛而受伤，受伤的皮肤不能作完好皮肤的毒性试验。破损皮肤的制作采用不同方法将去毛消毒皮肤划破(消毒手术刀作井字划破或砂纸磨擦打毛)，以渗血为度。 (二)黏膜给药 尽量模拟临床的用药途径。保证受试物与黏膜接触4h以上。 需设赋形剂对照组。如赋形剂有毒性，应再设空白对照组。 (三)受试药 原则上尽量与临床用制剂一致，并保证受试物与皮肤接触良好。 1．剂量设置 (1)如果受试物毒性较大．预试验时提高剂量可使大部分动物死亡，应按全身给药的原则，没置几个剂量组(完整皮肤组和破损皮肤组备数个剂量组)。具体方法可参见本篇“急性毒性试验”。动物宜采用大鼠或豚鼠。 (2)如果受试物毒性较小，可只一个剂量组。每组家兔或猪4只，如用豚鼠需10只。并增加其他给药途径的最大给药量试验。 2．给药方法 受试物如为膏剂或液体剂型，可直接涂抹于去毛皮肤；如是固体粉末或中药散剂，需加适量水或其他赋形剂(如羊毛脂、凡上林、橄榄油等)混合均匀，以保证受试物与皮肤接触良好。 药物涂抹后应以适当的法固定，如用无刺激性纱布、胶布或有孔尼龙绷带固定；豚鼠或大鼠可用剪去指套的乳胶手套包住整个背部和腹部；如受试物是液体，应先覆以聚乙烯薄膜，防止液体挥发。同时要注意防止试验动物舔食受试物。 黏膜用药，如直肠或阴道或滴鼻或吸入用药时，可将动物固定；口腔用药时，可将药物涂抹在下唇与龈之间(不能排除动物舔食受试物)；或提高受试物的黏稠度；或分次数用药，目的是要保证受试物与黏膜接触4h以上。 有些毒性很小的外用制剂，也可用全身给药途径(如皮下注射等)反应其毒性。受试物剂量应以同面积不同浓度为宜。如采用其他方法，应说明理由。 3．给药周期 皮肤黏膜用药的急性毒性试验时，受试物与皮肤或黏膜接触不超过24h。根据中药特点，可适当提高浓度或增加24h内用药次数。给约24h后，用温水或无刺激溶剂除去残留受试物。 三、观察记录与检查 除去受试物后每日观察至第七日，记录动物的体重、皮肤毛发、眼和黏膜的变化，中毒表现的观察项与全身给药的急性毒性实验相同。若有死亡动物，应及时进行尸检，有肉眼可见的病变应进行病理组织学检查。 第二节 皮肤黏膜用药长期毒性试验 皮肤黏膜用药急性毒性试验目的是，观察动物皮肤(完整皮肤和破损皮肤)或黏膜反复多次接触受试物，因吸收作用而使机体产生的毒性反应。 一、动物 常用动物为成年健康的白色家兔(2kg左右)、白色豚鼠(0．3kg左右)、白色大鼠(0．2kg左右)或白色小型猪(7kg左右)，雌雄各半。婴儿用药应用更年轻的动物，如白色家兔(1．1kg左右)、白色豚鼠(0．2kg左右)。 二、实验方法 (一)皮肤准备 皮肤长期毒性试验和皮肤急性毒性试验的皮肤准备相同。 (二)受试药物 原则上尽量与临床用制剂—致，并保证受试物与皮肤接触良好。 1．剂量设置 皮肤黏膜用药的长期毒性试验，一般设高、低两个剂量组和一个对照组。高剂量组应是使动物产生严重毒性反应或有少数动物死亡的剂量，低剂量组应相当或略高于药效学有效剂量。具体方法可参见本篇“长期毒性试验”。如急毒试验浓度超过临床用量20倍(经剂量转换)而未出现毒性反应或死亡，叫只设一个相当临床用量20倍以上的剂量组和一个对照组。每组家兔6只或小型猪4只，如用豚鼠需10只。 2 给药方法 受试物如为膏剂或液体剂型，可直接涂抹于去毛皮肤上；