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1. 掌握紫外分光光度法的基本原理和方法。 2. 掌握752分光光度计的使用。 实验十 紫外分光光度法测定苯酚含量 实验目的 很多物质的溶液虽然无色,但在紫外区有特征吸收,根据朗伯-比尔定律,对在紫外区有特征吸收的物质进行分光光度测定的方法叫做紫外分光光度法。 一般能作紫外分光光度法测定的仪器也可作可见分光光度法测定,所以这种仪器常称紫外-可见分光光度计。 实验原理 仪器与试剂 752型分光光度计 容量瓶(50mL,5只) 移液管(5mL 1支) 烧杯(50mL) 苯酚标准溶液(0.50g·L-1):称取苯酚,用蒸馏水溶解,在容量瓶中稀释至刻度。 苯酚水溶液试样 苯酚标准溶液系列的配制 取5只50mL容量瓶,分别用移液吸管加入1、2、3、4、5mL 0.50g·L-1用蒸馏水稀释至刻度,摇匀。 苯酚水溶液吸收光谱的绘制 用苯酚标准溶液(30mg·L-1),在220~300nm波长范围内,以5nm为间隔,分别测其吸光度(用蒸馏水作参比),以波长为横坐标,吸光度为纵坐标绘制吸收曲线,找出?max。 标准曲线的绘制及未知溶液的测定 在选定的?max下,用水作参比,分别测定标准溶液系列的吸光度,绘制标准曲线。再在相同条件下测出未知液的吸光度,根据标准曲线计算出原未知液的含量。 实验步骤 【思考题】 1. 紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同??
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