课件：实验室常用仪器的使用与简单养护.ppt

常用仪器的使用与简单养护 常用仪器 4 移液器 1 2 3 5 电子天平 离心机 高压灭菌锅 干燥箱 移液器的类型 根据排液方式 一类是气垫式（内置）活塞移液器 （诺禾实验室常用） 一类是外置式活塞移液器 根据通道数 单道 多道（8道和12道） 还可以分为： 手动 自动（电动） 诺禾常用的移液器品牌有Eppendorf （德国）、RAININ（美国）、GILSON（法国）、Thermo（美国） 诺禾实验室常用的移液器 Eppendorf Research Plus 外部结构 1 控制钮—第一档：液体体积计量； 第二挡：排出吸嘴内剩余液体 2 调节钮—设定移液量 3 弹射键—弹除吸头 4 调整开孔—系统校正调整 5 弹射套筒 6 多道移液器下半段 7 盖板 8 下半段分离键 9 外罩 内部结构 活塞不与样品直接接触 活塞杆 工作原理 空气置换原理：通过活塞、弹簧的伸缩运动，调节空气负压和正压来实现吸液和排液。 排出部分空气 压力减小 按键下压 按键释放 活塞向下移动 活塞向上移动 量程内原则 —— 即所需移取的体积必须在移液器的量程内 半量程原则 —— 即使用同一移液器，在半量程以上相对于半量程以下要精确 就小不就大原则 ——即移取同一体积的液体，应选用最大量程较小的移液器 选择量程 量程：0.1-2.5ul、0.5-10ul、2-20ul、10-100ul、20-200ul、100-1000ul 容量设定 由大到小原则： 当由小容量调到大容量时，应调整到大于设定容量值的 1/4 圈，再回调至设定值，这样可排除机械间隙。（不要超过最大量程，否则可能会卡住内部机械装置而损坏移液器） 不同量程移液器技术参数： 量程 体积 系统误差 随机误差 10–100 μl 100 μl ±0.8% ±0.8 μl ±0.2% ±0.2 μl 20–200 μl 100 μl ±1.0% ±1.0 μl ±0.3% ±0.3 μl 安装吸头 吸头选择：与移液器相匹配！ 单道移液器——旋转安装法：将移液器垂直插入吸头，在稍许用力下压的同时，左右轻轻旋转，上紧吸头。 多道移液器———将移液器的第一道对准第一个吸头，倾斜插入，其它吸头前后摇动上紧。 正向吸液是常用的吸液方式 最适用于水性溶液，如： 水 缓冲液 稀盐溶液 稀酸碱溶液 吸液 按下控制钮至第一档； 将吸头垂直进入液面下1-5mm（视吸头容量而定）： 0.1-10 ul 容量 1 - 2 mm； 2-200 ul 容量 2 - 3 mm； 1 – 5 ml 容量 3 - 5 mm； 使控制钮缓慢滑回原位； 吸头移出液面前略等待1秒，至液面稳定； 缓慢提出移液器，确保吸头外壁无液体。 排液 将吸头以一定角度抵住容器内壁； 缓慢将控制钮按至第一档并等待约1－3秒； 将控制钮按至第二档同时，吸头嘴慢慢离开液面，使枪头完全排空； 按住控制钮，沿容器内壁拖出吸头，放开控制钮； 按压弹射键弃掉吸头。 （特殊情况需抵住容器底部或液面） 反向吸液 适用于： 易挥发液体 粘稠液体 小体积移液 反向吸液一般与预润湿吸液方式结合使用 相同液体反复吸、排2-3次，吸头内壁会形成一层同质液膜，可以补偿吸头的表面吸附，再进行移液比较准确。通过预润湿吸液的方式来可达到精确移液。 吸液、排液注意事项： 六个度： 角度——垂直吸液，贴壁排液 深度——吸头浸入液面 速度——慢吸慢放（液体越稠要越慢） 湿度——将吸头预润湿（反复吸排）2～3次 适度——吸排液时的停顿时间； 配合度——排液的速度与吸嘴离开液面（或内壁）的速度 使用完毕 移液器使用完毕后，按弹射键卸去吸头，把刻度调至最大量程，挂在移液器架上。 移液器中的O型环（密封圈）、弹簧和活塞是我们重点养护的对象。 一. 常见问题及处理方法 回弹不畅 1、检测：下压控制钮后，控制钮卡住或回弹不畅，可如下检查： 2、可能原因：弹簧受损、活塞污染 处理方法：反馈实验室管理，请专业工程师处理。 漏气（漏液） 1. 检测： 大量程，吸液后垂直静置 15 s，观察是否有液滴； 小量程则会有打不尽的现象。 移液不准 移取体积跟实际体积不相符 处理方法：反馈实验室管理，请专业工程师校正。 2. 可能的原因： - 吸头是否匹配？ 处理方法：更换匹配的吸头 - 装配吸头时有无上紧？ 处理方法：上紧吸头 - 移液器内部气密性不好？ 处理方法：反馈