第五章 酶化学.ppt

5.5.2 pH 的影响 在一定的pH 下, 酶具有最大的催化活性,通常称此pH 为最适 pH。 5.5.3 温度的影响 一方面是温度升高,酶促反应速度加快。 另一方面,温度升高,酶的高级结构将发生变化或变性，导致酶活性降低甚至丧失。 因此大多数酶都有一个最适温度。 在最适温度条件下,反应速度最大。 5.5.4 抑制剂对酶活性的影响 使酶的活性降低或丧失的现象，称为酶的抑制作用。 能够引起酶的抑制作用的化合物则称为抑制剂。 酶的抑制剂一般具备两个方面的特点： a.在化学结构上与被抑制的底物分子或底物的过渡状态相似。 b.能够与酶的活性中心以非共价或共价的方式形成比较稳定的复合体或结合物。 1) 抑制剂的作用方式 a. 不可逆抑制 抑制剂与酶反应中心的活性基团以共价形式结合，引起酶的永久性失活。如有机磷毒剂二异丙基氟磷酸酯。 b. 可逆抑制 抑制剂与酶蛋白以非共价方式结合，引起酶活性暂时性丧失。抑制剂可以通过透析等方法被除去，并且能部分或全部恢复酶的活性。根椐抑制剂与酶结合的情况，又可以分为两类. (1) 竟争性抑制 某些抑制剂的化学结构与底物相似，因而能与底物竟争而与酶活性中心结合。当抑制剂与活性中心结合后，底物被排斥在反应中心之外，其结果是酶促反应被抑制了。 竟争性抑制通常可以通过增大底物浓度，即提高底物的竞争能力来消除。 竟争性抑制 竟争性抑制 竟争性抑制 可逆抑制作用的动力学特征 竞争性抑制 (2) 非竟争性抑制 酶可同时与底物及抑制剂结合，引起酶分子构象变化，并导至酶活性下降。由于这类物质并不是与底物竞争与活性中心的结合，所以称为非竞争性抑制剂。 如某些金属离子（Cu2+、Ag+、Hg2+）以及EDTA等，通常能与酶分子的调控部位中的-SH基团作用，改变酶的空间构象，引起非竞争性抑制。 非竟争性抑制 (2) 非竟争性抑制 酶可同时与底物及抑制剂结合，引起酶分子构象变化，并导至酶活性下降。由于这类物质并不是与底物竞争与活性中心的结合，所以称为非竞争性抑制剂。 如某些金属离子（Cu2+、Ag+、Hg2+）以及EDTA等，通常能与酶分子的调控部位中的-SH基团作用，改变酶的空间构象，引起非竞争性抑制。 非竟争性抑制 (2) 非竟争性抑制 酶可同时与底物及抑制剂结合，引起酶分子构象变化，并导至酶活性下降。由于这类物质并不是与底物竞争与活性中心的结合，所以称为非竞争性抑制剂。 如某些金属离子（Cu2+、Ag+、Hg2+）以及EDTA等，通常能与酶分子的调控部位中的-SH基团作用，改变酶的空间构象，引起非竞争性抑制。 非竟争性抑制 可逆抑制作用的动力学特征 加入竞争性抑制剂后，Km 变大，酶促反应速度减小。 竞争性抑制 无抑制剂 竞争性抑制剂 1/Vmax (2) 非竟争性抑制 酶可同时与底物及抑制剂结合，引起酶分子构象变化，并导至酶活性下降。由于这类物质并不是与底物竞争与活性中心的结合，所以称为非竞争性抑制剂。 如某些金属离子（Cu2+、Ag+、Hg2+）以及EDTA等，通常能与酶分子的调控部位中的-SH基团作用，改变酶的空间构象，引起非竞争性抑制。 非竟争性抑制 加入非竞争性抑制剂后，Km 虽然不变，但由于Vmax减小，所以酶促反应速度也下降了。 非竞争性抑制 无抑制剂 非竞争性抑制剂 -1/km 作业及思考题 比较三种可逆性抑制作用的特点。 1．酶的活性中心是指酶分子： A．上的几个必需基团 B．与底物结合的部位 C．结合底物并发挥催化作用的部位 D．中心部位的一种特殊结构 E．催化底物变成产物的部位 ? 2．米－曼氏方程中的Km为： A．（K1+K2）/K3 B．（K2+K3）/K1 C．K2/K1 D．K3 [Et] E．K2/K3 ? 3．当酶促反应 v=80%Vmax时，[S] 为Km 的倍数是： A．4 B．5 C．10 D．40 E．80? 作业及思考题 ? 4．酶的竞争性抑制剂的动力学特点是 A．Vmax和Km都不变 B．Vmax不变，Km↓ C．Vmax↑，Km不变? D．Vmax↓，Km不变 E．Vmax不变，Km↑ ? 5．酶的磷酸化修饰主要发生在哪种氨基酸上？ A．Thr B．Cys C．Glu 作业及思考题 ? 6．有机磷农药结合酶活性中心的基团是： A．氨基 B．羟基 C．羧基 D．咪唑基 E．巯基 ? 7．酶原激活的实质是： A．酶原分子的某些基团被修饰 B．酶蛋白的变构效应 C．酶的活性中心形成或暴露的过程 D．酶原分子的空间构象发生了变化而一级结构不变 E．激活剂与酶结合使酶激活 ? ? 10．唾液淀粉酶经透析后，水解淀粉能力显著降低，其主要原因是： A．酶蛋白变性 B．失去Cl- C．失去辅酶 D．酶含量减少 E．失去Mg2+ * ? 结构专一性 有些酶对底物的要求非常严