仪器分析分化紫外可见分光光度法终.ppt

续前 3．对照法：外标一点法 注：当样品溶液与标准品溶液的 稀释倍数相同时 练习 例： 维生素B12的含量测定 精密吸取B12注射液2.50mL，加水稀释至10.00mL；另配制对照液，精密称定对照品25.00mg，加水稀释至1000mL。在361nm处，用1cm吸收池，分别测定吸光度为0.508和0.518，求B12注射液注射液的浓度以及标示量的百分含量（该B12注射液的标示量为100μg / mL）见书P203例题 解： 1）对照法 练习 2）吸光系数法 练习 解： 1．取咖啡酸，在165℃干燥至恒重，精密称取10.00mg，加少量 乙醇溶解，转移至200mL容量瓶中，加水至刻度线，取此溶 液5.00mL，置于50mL容量瓶中，加6mol/L的HCL 4mL，加 水至刻度线。取此溶液于1cm比色池中，在323nm处测定吸 光度为0.463，已知该波长处的 ，求咖啡酸百分 含量（见书后P215 题16） 练习 解： 2．精密称取0.0500g样品，置于250mL容量瓶中，加入 0.02mol/L HCL溶解，稀释至刻度。准确吸取2mL，稀释至 100mL。以0.02mol/L HCL为空白,在263nm处用1cm吸收池 测定透光率为41.7%，其摩尔吸光系数为12000，被测物分 子量为100.0，试计算263nm处 和样品的百分含量。 （见书后P215题17） 上海光机所科技考古中心与敦煌研究院保护研究所合作，采用上海光机所OURSTEX 100FA型便携式能量色散型X射线荧光分析仪和LabRAM XploRA便携式激光共焦拉曼光谱仪，对敦煌莫高窟465窟东壁、北壁和南壁等多处的壁画颜料的化学成分和主要物相进行了原位、无损分析，成功识别出了朱砂、炭黑、铁红、铅红、石绿等多种矿物颜料。 2. 单色器　　 单色器的作用是将来自光源的光按波长的长短顺序分散为单色光并能随意调节所需波长的光。主要由入射狭缝、准直镜、色散元件、物镜和出射狭缝组成。 (1) 入射狭缝用于限制杂散光进入单色器； (2) 准直镜将入射光束变为平行光束后进入色散元件； (4) 物镜将出自色散元件的平行光聚焦于出口狭缝； (5) 出射狭缝用于限制通带宽度。 (3) 色散元件把混合光分散为单色光，是单色器的关键部分；常用的色散元件有：棱镜、光栅、滤光片。 3．吸收池：液池，样品池 玻璃——能吸收UV光，仅适用于可见光区 石英——不能吸收紫外光，适用于紫外和可见光区 要求：匹配性（对光的吸收和反射应一致） 如何配对能达到匹配性？ 000 000 续前 5．记录装置：讯号处理和显示系统 光电池 光电管 光电倍增管 二极管阵列检测器 4．检测器：将光信号转变为电信号的装置 光电倍增管 光电倍增管是检测微弱光信号的光电元件。 它由密封在真空管壳内的一个光阴极、多个倍增极（亦称打拿极）和一个阳极组成。 通常两极间的电压为75-100V，九个倍增极的光电倍增管的总放大数为106-107 光电倍增管的暗电流是仪器噪音的主要来源 阴极 阳极 紫外-可见分光光度计，按其光学系统可分为单光束与双光束分光光度计、单波长与双波长分光光度计。 原理：由光源发出的连续光谱，进入单色器经色散元件分光，获得的单色光分别通过参比溶液和样品溶液，进行光强度（吸收）的测定。 0.575 光源 单色器 吸收池 检测器 显示 三、紫外-可见分光光度计的类型 1. 单光束分光光度计 单光束分光光度计只有一个光通道，分光后的单色光直接透过吸收池，交互测定样品池和参比池，结构简单，适用于测定特定波长的吸收，进行定量。但仪器受电源、光源、检测器等波动的影响较大，不能扣除这些波动的干扰，空白样品和待测样品单独测量，每换一个波长都要用空白溶液重新校正，不能准确地扣除空白值。 Pictures of single beam UV-Vis spectrophotometers (Spectronic 20D) Zero Adjust 100% Adjust Wavelength selector readouts Sample Compartment Wavelength selector Zero Adjust 100% Adjust 原理：由光源发出的光通过单色器分光，将一束单色光从狭缝送出，经光束分裂器分成强度相等的两束光，一束通过参比池，另一束通过样品池，仪器测得的是透过样品溶液和参比溶液的光信号强度之比，比值